[发明专利]一种苹果酵素及其制备方法

摘要

一种苹果酵素，以苹果为主要原料，经榨汁、过滤后与纯净水混匀，所得原料混合物中再加入为原料混合物总重量3%的葡萄糖，然后调pH值为6.0‑7.0，灭菌，得到的发酵原料液中接种毕赤酵母亚种Pichia kudriavzevii PKD3001，然后控制转速为120r/min，温度为25‑35℃进行发酵24‑72h，得到的发酵液中，按每升发酵液计算，在其中依次添加蔗糖40‑80g，柠檬酸5‑10g，羧甲基纤维钠2‑4g，混匀后于121℃杀菌20min，然后罐装，即得苹果酵素成品。所得苹果酵素成品与自然发酵方法所得的苹果酵素相比，其抗氧化活性指标提高75%，酒精产量低于1%。

主权项

一种苹果酵素的制备方法，其特征在于该制备方法，即以新鲜成熟度好的苹果为主材料，用毕赤酵母亚种Pichia kudriavzevii PKD 3001进行发酵制备而成，其制备过程具体包括如下步骤：（1）、菌种的选取所用的菌种，是2016年9月29日于中国典型培养物保藏中心保藏的，其保藏编号为CCTCC NO: M 2016537的毕赤酵母亚种Pichia kudriavzevii PKD 3001冷冻干燥管；（2）、发酵原料液的制备将新鲜、成熟度好、天然酵素含量高的苹果用自来水清洗干净后经吹干、去核、用榨汁机进行榨汁、用100目纱布过滤得到纯苹果汁，然后与纯净水混合，得到原料混合物，其中纯苹果汁与纯净水的比例，按体积百分比计算，纯苹果汁：纯净水为10%:90%；在上述所得的原料混合物中再加入原料混合物总重量3%的葡萄糖，经1mol/L食用碳酸钠水溶液调pH值为6.0‑7.0，然后于105℃灭菌10min得到发酵原料液；（3）、菌种活化用接种环取无菌水溶解的冷冻干燥管保存的毕赤酵母亚种Pichia kudriavzevii PKD3001菌种一环在马铃薯葡萄糖琼脂培养基平板上划线，在培养箱中30℃培养24h，得到平板活化菌种；（4）、种子培养用接种环取步骤（3）所得的平板活化菌种一环接入装有50mL 麦芽浸粉肉汤液体培养基的250mL规格的三角瓶中，置于温度30℃的培养箱中，然后控制转速为120rpm，恒温培养36h，得到培养液；将上述所得的培养液控制转速为5000r/min进行离心20min, 离心所得的沉淀用0.01mol/L无菌磷酸缓冲盐溶液清洗3次，然后在清洗后的沉淀中加入50mL 0.01mol/L无菌磷酸缓冲盐溶液经500rpm下漩涡震荡重悬菌体，得到种子液，所得的种子液中，每毫升种子液中含毕赤酵母亚种Pichia kudriavzevii PKD 3001为1×108‑1×1010 cfu；（5）、发酵培养在步骤（2）所得的发酵原料液中，按1×105 cfu/mL接种量将步骤（4）得到的种子液接入步骤（2）所得的发酵原料液中，然后控制转速为120r/min，温度为25‑35℃进行发酵24‑72h，得到发酵液；（6）、综合调配在步骤（5）所得的发酵液中，按每升发酵液计算，在发酵液中依次添加蔗糖40‑80g，柠檬酸5‑10g，稳定剂羧甲基纤维钠2‑4g，混匀后于121℃杀菌20min，然后罐装，即得苹果酵素成品。