[发明专利]一种厚朴花低聚糖及多糖的制备方法

摘要

本发明涉及一种厚朴花低聚糖及多糖的制备方法及应用，可有效解决厚朴花低聚糖及多糖的制备及厚朴花低聚糖在制备抗氧化的药物、保健品、食品添加剂及化妆品中的应用问题，制备的厚朴花多糖在制备增强免疫力的药物和保健品中的应用问题。

主权项

1.一种厚朴花低聚糖及多糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)厚朴花粗低聚糖提取液的制备称取厚朴花药材，加入药材重量8～21倍量沸程60～90℃的石油醚，浸泡25min，70℃水浴回流提取35～90min，过滤，药渣挥尽沸程60～90℃的石油醚，晾干，加入80％乙醇(v/v)超声提取2次，每次加入80％乙醇(v/v)的量为厚朴花药材重量的8～20倍量，每次提取时间30～60min，过滤，药渣备用，合并滤液，45℃减压浓缩至比重为1.08～1.16得厚朴花粗低聚糖提取液，备用；(2)厚朴花粗多糖的制备取纤维素酶和木瓜蛋白酶按照3.2:1～5.1:1的重量比混合，加蒸馏水溶解制成质量浓度为0.4％～1.1％的混合酶溶液；取步骤(1)中提取厚朴花低聚糖后的厚朴花药渣，按重量加入15～27倍的混合酶溶液，用盐酸调pH至4.5～5.7，45～58℃搅拌酶解6～9h，99℃加热15min灭酶，酶解液放至室温，得厚朴花粗多糖溶液；厚朴花粗多糖溶液减压回收溶剂至厚朴花药材重量的1.3～1.9倍，5000r/m离心15min,取上清液即得厚朴花粗多糖浓缩液，浓缩液在搅拌下加入95％的乙醇(v/v)，使浓缩液中含醇量为75％～80％(v/v)，静置12h，滤去上部液体，得底部沉淀物，用无水乙醇洗去沉淀物中的水分，再用丙酮洗去沉淀物中的无水乙醇，最后用无水乙醚洗去沉淀物中的丙酮，22～50℃下减压干燥，得厚朴花粗多糖；(3)厚朴花低聚糖及多糖的纯化Ⅱ型ZTC1+1天然澄清剂溶液的配制A组分溶液：称取A组分1份，加入A组分99倍重量的蒸馏水，配制成质量浓度为1％的溶液，即得Ⅱ型ZTC1+1天然澄清剂A组分溶液；B组分溶液：称取B组分1份，加入B组分99倍重量的1％乙酸(v/v)，配制成质量浓度为1％的溶液，即得Ⅱ型ZTC1+1天然澄清剂B组分溶液；取步骤(1)所制备的厚朴花粗低聚糖提取液，加入厚朴花低聚糖提取液质量1/40的Ⅱ型ZTC1+1天然澄清剂B组分溶液，混匀，80℃水浴加热40min，每间隔5min搅拌1次，每次搅拌时间为3min，40min后加入厚朴花低聚糖提取液质量1/40的Ⅱ型ZTC1+1天然澄清剂A组分溶液，边加边搅拌，1h后搅拌1次，搅拌时间10min，继续80℃水浴加热1.5h，6000r/min离心10min，倾出上清液，减压浓缩成比重为1.10～1.20的浸膏，加入95％乙醇(v/v)至含醇量达75％(v/v)，静置8h，6000r/min离心15min，倾出上清液，弃去沉淀，上清液减压浓缩成比重为1.10～1.20的浸膏，冷冻干燥即得厚朴花低聚糖粉末；取步骤(2)所制备的厚朴花粗多糖，加厚朴花粗多糖10倍重量的蒸馏水80℃水浴加热使溶解，冷却至室温，加入30％过氧化氢(v/v)，加入30％过氧化氢(v/v)的体积为厚朴花粗多糖溶液体积的1/4～1/3，混匀，加氢氧化钠调节pH至7.5～9.1，70℃水浴下不断搅拌30min，100℃加热5～10min，抽滤，滤液减压浓缩至比重为1.10～1.15的浸膏，过Sephadex G‑200凝胶树脂柱，收集多糖部分洗脱液，冷冻干燥即得厚朴花多糖粉末。