[发明专利]一种快速检测2-酮基-L-古龙酸的方法有效
| 申请号： | 201610888538.X | 申请日： | 2016-10-11 |
| 公开（公告）号： | CN106520909B | 公开（公告）日： | 2019-07-02 |
| 发明（设计）人： | 周景文;陈坚;曾伟主;陈玥;堵国成 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12Q1/26 | 分类号： | C12Q1/26 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种快速检测2‑酮基‑L‑古龙酸的方法，属于微生物生产技术领域。2‑KLG还原酶可以催化2‑KLG发生反应，而反应过程需要NADPH的消耗，NADPH在340nm可见光下具有最大吸收值，根据NADPH消耗可以快速的通过测量OD340得到2‑KLG的量。该方法特异性好、反应灵敏、操作简单和可高通量检测，与HPLC相比，检测误差小于5％，为生产2‑KLG菌株的改造和筛选奠定了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 快速 检测 酮基 古龙酸 方法 | ||
【主权项】：
1.一种快速检测2‑酮基‑L‑古龙酸的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)向待测样品中加入终浓度为0.5～1.2mmol/L的NADPH和10～30U/L的2‑酮基‑L‑古龙酸还原酶，在20～35℃下反应5～40min，在340nm下对反应前后的待测样品OD值进行检测，获得△OD340；(2)建立△OD340与NADPH含量的线性关系，根据1mol NADPH的消耗量对应1mol2‑酮基‑L‑古龙酸消耗量计算2‑KLG的含量。
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