[发明专利]用于多重核酸测序的标签和引物

摘要

本发明涉及分子生物学技术领域，具体涉及用于多重核酸测序的标签和用于构建真菌ITS序列多重测序文库的PCR引物。本发明提供的Index经过庞大数量的实际测序检验，将其包含于测序或建库引物后，混合测序反应得到的测序数据平衡性相对较好，进而能够更加真实可靠地反应样品中的真菌组成情况。本发明提供的用于构建真菌ITS序列多重测序文库的PCR引物比现有的常规ITS引物的特异性更高，不仅能够对动物肠道、水体以及大曲等复杂性相对较低的样品类型获得高特异的扩增产物；对土壤和淤泥等高复杂性的样品类型也具有较高的特异性，因此保障了后续测序结果的准确性，进而能够获得相对更加准确的分析结果和更加真实的真菌组成情况。

主权项

1.一组用于构建土壤样品中真菌ITS序列多重测序文库的PCR引物，其特征在于：所述的一组PCR引物包括正向引物组和反向引物组；/n所述的正向引物组由以下引物组成：/n引物F1：其序列为SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列，其中含有Index1：ACGATGCT；/n引物F2：其序列为SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列，其中含有Index2：AGACTGTC；/n引物F3：其序列为SEQ ID NO：3所示的核苷酸序列，其中含有Index3：AGCATCGT；/n引物F7：其序列为SEQ ID NO：7所示的核苷酸序列，其中含有Index7：ATCGTAGC；/n引物F8：其序列为SEQ ID NO：8所示的核苷酸序列，其中含有Index8：CAGACTGT；/n引物F9：其序列为SEQ ID NO：9所示的核苷酸序列，其中含有Index9：CGATGCTA；/n引物F12：其序列为SEQ ID NO：12所示的核苷酸序列，其中含有Index12：CGTAGCAT；/n引物F13：其序列为SEQ ID NO：13所示的核苷酸序列，其中含有Index13：CTACGATG；/n引物F14：其序列为SEQ ID NO：14所示的核苷酸序列，其中含有Index14：GACAGTCT；/n引物F23：其序列为SEQ ID NO：23所示的核苷酸序列，其中含有Index23：GCATCGTA；/n所述的反向引物组由以下引物组成：/n引物R15：其序列为SEQ ID NO：44所示的核苷酸序列，其中含有Index15：CTCTGCCT；/n引物R17：其序列为SEQ ID NO：46所示的核苷酸序列，其中含有Index17：CCTACTAT；/n引物R18：其序列为SEQ ID NO：47所示的核苷酸序列，其中含有Index18：CGATGCTG；/n引物R19：其序列为SEQ ID NO：48所示的核苷酸序列，其中含有Index19：ATGCTAAT；/n引物R21：其序列为SEQ ID NO：50所示的核苷酸序列，其中含有Index21：GCGTCTAT；/n引物R25：其序列为SEQ ID NO：54所示的核苷酸序列，其中含有Index25：GGAGTCCT；/n引物R26：其序列为SEQ ID NO：55所示的核苷酸序列，其中含有Index26：GCTCGAGC；/n引物R27：其序列为SEQ ID NO：56所示的核苷酸序列，其中含有Index27：AAGGCATA；/n引物R28：其序列为SEQ ID NO：57所示的核苷酸序列，其中含有Index28：ACTGCGGA；/n引物R29：其序列为SEQ ID NO：58所示的核苷酸序列，其中含有Index29：AGGCGCTA。/n