[发明专利]一种O-取代羟胺荧光衍生化试剂的制备与纯化方法

摘要

本发明涉及一种O‑取代羟胺系列荧光衍生化试剂的制备与纯化方法。以四正丁基溴化胺和氢氧化钾为催化剂，咔唑与α，ω‑二卤代烷烃反应得中间体I[9‑(ω‑氯代烷基)‑9H‑咔唑或9‑(ω‑溴代烷基)‑9H‑咔唑]；中间体I在碳酸钾的催化下在二甲基甲酰胺中与N‑羟基‑5‑降冰片烯‑2，3‑二酰亚胺反应得中间体II[(3aR，4R，7S，7aS)‑2‑((9H‑咔唑‑9‑基)烷氧基)‑3a，4，7，7a‑四氢‑1H‑4，7‑亚甲基异吲哚‑1，3(2H)‑二酮]；中间体II经柱层析纯化后与水合肼反应即得目标产物O‑(ω‑(9H‑咔唑‑9‑基)烷基)羟胺。纯化方法是先将目标产物混悬于水中，调节至酸性后用有机溶剂萃取除去杂质，水层再调节至碱性用有机溶剂萃取，回收有机溶剂至干，所得化合物即可用于醛类化合物的柱前衍生化‑液相色谱法测定或含醛基化合物的荧光标记。

主权项

1.一种O‑取代羟胺类荧光衍生化试剂O‑(ω‑(9H‑咔唑‑9‑基)烷基)羟胺的制备与纯化方法，其主要步骤有：a)中间体I的合成将咔唑溶于反应溶剂中，先加入α，ω‑二卤代烷烃，再加入相转移催化剂四正丁基溴化胺，搅拌均匀后缓慢滴入50％的KOH水溶液，滴加完毕于30～90℃下搅拌反应2～6h；反应完成后，减压除去未反应的溶剂得固体，用水洗后过滤，所得产物烘干即得中间体I；其中α，ω‑二卤代烷的量为咔唑物质的量的3‑20倍；四正丁基溴化胺的量为咔唑物质的量的0.01‑0.2倍；50％的KOH水溶液为质量浓度，用量为咔唑质量的2‑10倍；b)中间体II的合成将步骤a)得到的中间体I用二甲基甲酰胺溶解后加入N‑羟基‑5‑降冰片烯‑2，3‑二酰亚胺和催化剂碳酸钾，60‑75℃下反应2‑10h；反应结束后，萃取，无水硫酸钠干燥，减压除去溶剂，经柱层析纯化得白色固体即为中间体II的纯品；其中N‑羟基‑5‑降冰片烯‑2，3‑二酰亚胺和碳酸钾的量都为咔唑物质的量的1‑3倍；c)O‑(ω‑(9H‑咔唑‑9‑基)烷基)羟胺的合成将步骤b)得到的中间体II的纯品用乙醇溶解之后与水合肼加热回流反应0.5‑2小时，减压除去反应液中未反应的肼和溶剂乙醇，即得O‑(ω‑(9H‑咔唑‑9‑基)烷基)羟胺粗品；d)O‑(ω‑(9H‑咔唑‑9‑基)烷基)羟胺的纯化向步骤c)得到的O‑(ω‑(9H‑咔唑‑9‑基)烷基)羟胺粗品中加少量水和氯仿，加盐酸使水相呈酸性，会有白色蓬松固体析出，过滤可得O‑(ω‑(9H‑咔唑‑9‑基)烷基)羟胺的盐酸盐；取盐酸盐溶于水，加氨水使溶液呈碱性，使O‑(ω‑(9H‑咔唑‑9‑基)烷基)羟胺游离成为羟胺的形式，用氯仿萃取，氯仿层用无水硫酸钠干燥，过滤后减压除净氯仿即得O‑(ω‑(9H‑咔唑‑9‑基)烷基)羟胺的纯品。