[发明专利]扩增DNA的方法

摘要

本申请涉及一种扩增基因组DNA的方法，包括：(a)提供第一反应混合物，包括包含基因组DNA的样本、第一引物、核苷酸单体混合物和核酸聚合酶，其中所述第一引物从5’端到3’端包含通用序列和包括第一随机序列的第一可变序列；(b)将第一反应混合物置于第一温度循环程序获得预扩增产物；(c)提供第二反应混合物，包括预扩增产物、第二引物、核苷酸单体混合物和核酸聚合酶，其中所述第二引物从5’端到3’端包含或由特定序列及所述通用序列组成；(d)将第二反应混合物置于第二温度循环程序进行扩增，获得扩增产物。本申请还涉及一种用于扩增基因组DNA的试剂盒。

主权项

一种扩增基因组DNA的方法，所述方法包括：(a)提供第一反应混合物，其中所述第一反应混合物包括包含所述基因组DNA的样本、第一引物、核苷酸单体混合物和核酸聚合酶，其中所述第一引物从5’端到3’端包含通用序列和第一可变序列，所述第一可变序列包括第一随机序列，其中所述第一随机序列从5’端到3’端依次为X_a1X_a2……X_an，所述第一随机序列的X_ai(i＝1‑n)均属于同一个集合，所述集合选自B、或D、或H、或V，其中B＝{T、G、C}，D＝{A、T、G}，H＝{T、A、C}，V＝{A、C、G}，其中X_ai表示第一随机序列5’端的第i个核苷酸，n是选自3‑20的正整数，可选地，所述第一反应混合物进一步包括第三引物，其中所述第三引物从5’端到3’端包含所述通用序列和第三可变序列，所述第三可变序列包括第三随机序列，其中所述第三随机序列从5’端到3’端依次为X_b1X_b2……X_bn，所述第三随机序列的X_bi(i＝1‑n)均属于同一个集合，所述集合选自B、或D、或H、或V，其中B＝{T、G、C}，D＝{A、T、G}，H＝{T、A、C}，V＝{A、C、G}，并且X_bi(i＝1‑n)和X_ai(i＝1‑n)属于不同的集合，其中X_bi表示第三随机序列5’端的第i个核苷酸，n是选自3‑20的正整数；(b)将所述第一反应混合物置于第一温度循环程序进行预扩增，获得预扩增产物；(c)提供第二反应混合物，所述第二反应混合物包括步骤(b)中得到的预扩增产物、第二引物、核苷酸单体混合物和核酸聚合酶，其中所述第二引物从5’端到3’端包含或由特定序列及所述通用序列组成；(d)将所述第二反应混合物置于第二温度循环程序进行扩增，获得扩增产物。