[发明专利]一种快速检测玉米赤霉烯酮的方法有效
申请号: | 201610045201.2 | 申请日: | 2016-01-24 |
公开(公告)号: | CN105713966B | 公开(公告)日: | 2020-08-11 |
发明(设计)人: | 易守军;曾云龙;任婕凤;刘婷;黄昊文;张起豪;邓克勤;唐春然 | 申请(专利权)人: | 湖南科技大学 |
主分类号: | C12Q1/6816 | 分类号: | C12Q1/6816;C12N15/115 |
代理公司: | 张家界市慧诚商标专利事务所 43209 | 代理人: | 高红旺 |
地址: | 411201 *** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | 本发明涉及一种快速检测玉米赤霉烯酮的方法,该方法包括如下步骤:(A)使玉米赤霉烯酮核酸适体(Apt)和可与玉米赤霉烯酮核酸适体杂交的单链信号探针ssDNA杂交,形成杂交链;(B)使该杂交链与待测样品接触,当待测样品中有玉米赤霉烯酮存在时,杂交链与玉米赤霉烯酮反应释放出单链信号探针ssDNA;(C)利用DNA扩增,使杂交链成双链DNA,然后用核酸外切酶选择性地催化双链DNA水解成单核苷酸,体系中单链信号探针ssDNA不水解而保留下来;(D)在铜离子还原检测体系中检测体系荧光强度,从而测定待测样品中的真菌毒素玉米赤霉烯酮的含量。所述方法可以消除干扰,提高了玉米赤霉烯酮的检测灵敏度和精度。 | ||
搜索关键词: | 一种 快速 检测 玉米 赤霉烯酮 方法 | ||
【主权项】:
一种快速检测玉米赤霉烯酮的方法,其特征是,该方法包括如下步骤:(A)玉米赤霉烯酮核酸适体Apt与单链信号探针ssDNA杂交,形成杂交链;(B)使该杂交链与待测样品作用,当待测样品中有玉米赤霉烯酮存在时,杂交链选择性地与玉米赤霉烯酮反应释放出单链信号探针ssDNA;(C)为了消除杂交链的干扰,利用DNA扩增,使杂交链成双链DNA,然后用核酸外切酶选择性地催化双链DNA水解成单核苷酸,体系中单链信号探针ssDNA不水解而保留下来;(D)利用铜离子不能在玉米赤霉烯酮核酸适体‑玉米赤霉烯酮结合体中被还原生成荧光发射峰在620 nm左右的铜纳米粒子,铜离子只在单链信号探针ssDNA中还原并生成被ssDNA修饰的在620 nm左右有强的荧光发射的铜纳米粒子的原理,在铜离子还原检测体系中检测体系的荧光强度,从而测定待测样品中的真菌毒素玉米赤霉烯酮的含量。
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