[发明专利]一种利用方波电击进行莱茵衣藻高效建库的方法有效
| 申请号： | 201610020152.7 | 申请日： | 2016-01-13 |
| 公开（公告）号： | CN105543281B | 公开（公告）日： | 2019-12-27 |
| 发明（设计）人： | 王亮;范志月;杨丽婧;杨丰源;陆军;郑元林 | 申请（专利权）人： | 江苏师范大学 |
| 主分类号： | C12N15/90 | 分类号： | C12N15/90;C12N1/13 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 221000 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 一种利用方波电击进行莱茵衣藻高效建库的方法，包括以下步骤：莱茵衣藻在TAP液体培养基，23±0.5°C，连续光照，8000Lx光强下进行通气培养，经过转接后培养、处理，将抗性DNA片段经过方波电击转化，抗性DNA随机整合进入莱茵衣藻染色体中，经过过夜弱光恢复，涂布于抗性筛选平板，经过7天光周期培养，获得引起随机插入突变的突变体文库。此方法的优点是可以高效的获得大量随机插入的转化子，构建莱茵衣藻突变体文库。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 方波 电击 进行 莱茵衣藻 高效 方法 | ||
【主权项】：
1.一种利用方波电击进行莱茵衣藻高效建库的方法，其特征在于，莱茵衣藻在TAP液体培养基，23±0.5℃，连续光照，8000Lx光强下进行通气培养，经过转接后培养、处理，将抗性DNA片段经过方波电击转化，抗性DNA随机整合进入莱茵衣藻染色体中，经过过夜弱光恢复，涂布于抗性筛选平板，经过7天光周期培养，获得引起随机插入突变的突变体文库；/n所述的方波电击条件为使用BTXECM830电击仪，设置参数电压500V，电击时间4ms，电击波段6-7次，每次电击时间间隔100ms，电击完毕冰浴放置10min;/n所述的莱茵衣藻即实验藻种：21gr（CC1690），属于莱茵衣藻（Chlamydomonasreinhardtii）的一个品系；/n所述TAP液体培养基为：TAP盐溶液25ml/L，磷酸盐溶液0.375ml/L，Hutner微量元素1ml/L，乙酸1ml/L，Tris2.42g/L，121°C高压蒸汽灭菌20min；/n所述的TAP盐溶液为：NH
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