[发明专利]一种检测植物自噬现象的基因定位表达载体及应用在审
| 申请号： | 201610017008.8 | 申请日： | 2016-01-08 |
| 公开（公告）号： | CN105441470A | 公开（公告）日： | 2016-03-30 |
| 发明（设计）人： | 周会娜;陈千思;刘萍萍;陈霞;金立锋;翟妞;郑庆霞;张慧;林福呈;徐国云 | 申请（专利权）人： | 中国烟草总公司郑州烟草研究院 |
| 主分类号： | C12N15/66 | 分类号： | C12N15/66;G01N21/64 |
| 代理公司： | 郑州优盾知识产权代理有限公司 41125 | 代理人： | 郑园;张真真 |
| 地址： | 450001 河南省*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，具体涉及检测细胞自噬现象的基因载体的构建。应用本发明设计的Atg8基因定位表达载体，使其蛋白与GFP的蛋白融合后在悬浮细胞中表达，通过激光共聚焦显微镜检测融合蛋白的位置而进行的亚细胞定位，是一种简便而又准确的在活细胞中进行定位的方法，为研究烟草细胞自噬现象的分子机理提供参考依据。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 检测 植物 现象 基因 定位 表达 载体 应用 | ||
【主权项】：
一种检测植物自噬现象的基因定位表达载体的构建方法，其特征在于：以红花大金元烟草品种为材料，提取RNA，反转录得cDNA，以NtAtg8‑F/NtAtg8‑R为引物对，进行PCR扩增NtAtg8基因，双酶切体系处理DNA片段并回收，采用同样的双酶切体系处理pFF19‑GFP质粒并回收；将含有同样粘性末端的NtAtg8基因和pFF19‑GFP载体进行连接，连接产物转化到DH5α感受态细胞中，挑选阳性菌落测序验证。
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