[发明专利]核酸酶介导的DNA组装有效
申请号: | 201580045198.8 | 申请日: | 2015-06-23 |
公开(公告)号: | CN106715694B | 公开(公告)日: | 2020-10-20 |
发明(设计)人: | 克里斯·舒恩赫;约翰·麦克沃特;科里·莫蒙;林恩·麦克唐纳;安德鲁·J.·墨菲;格雷格·S.·沃肖;约瑟·F.·罗哈斯;卡曼·维纳斯·莱;大卫·M.·巴伦苏埃拉;凯特琳·蒙塔尼亚 | 申请(专利权)人: | 瑞泽恩制药公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12N15/64;C12N15/66 |
代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 郝传鑫 |
地址: | 美国纽约*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | 本文提供了一种方法,所述方法使用序列特异性核酸酶试剂(例如,gRNA‑Cas复合物)组装至少两个核酸以形成具有互补性的末端序列,随后组装所述重叠互补序列。所述核酸酶试剂(例如,gRNA‑Cas复合物)可以在dsDNA中形成双链断裂而形成重叠末端序列,或者可以在每条链上形成切口而产生互补悬垂末端序列。采用本文所述方法进行的组装可以组装任何具有重叠序列的核酸,或者可以使用接合寡核苷酸来组装不具有互补末端的序列。 | ||
搜索关键词: | 核酸酶 dna 组装 | ||
【主权项】:
一种用于组装至少两个核酸的方法,包括:(a)使第一核酸与第一核酸酶试剂接触,其中所述第一核酸酶试剂在第一靶位点处切割所述第一核酸,以产生第一经酶切的核酸,在所述第一经酶切的核酸与第二核酸之间具有重叠末端序列;(b)使所述第一经酶切的核酸和所述第二核酸与核酸外切酶接触,以暴露所述第一经酶切的核酸与所述第二核酸之间的互补序列;以及(c)组装由步骤(b)生成的所述两个核酸片段。
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