[发明专利]在低盐条件下的等温扩增有效
申请号: | 201580015896.3 | 申请日: | 2015-03-18 |
公开(公告)号: | CN106460040B | 公开(公告)日: | 2021-01-08 |
发明(设计)人: | R.C.赫勒;J.R.尼尔森;P.L.帕特尔;A.M.维克菲尔德;S.J.卡珀 | 申请(专利权)人: | 通用电气公司 |
主分类号: | C12Q1/6844 | 分类号: | C12Q1/6844;C12P19/34 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 徐晶;鲁炜 |
地址: | 美国*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: |
本文提供用于等温核酸扩增的方法和试剂盒,其使用靶向核酸模板;包含具有链替代活性的DNA聚合酶、脱氧核糖核苷三磷酸酯(dNTP)混合物、具有3’端和5’端的引物、分子拥挤剂和缓冲溶液的反应混合物,以便扩增所述靶向核酸模板。所述缓冲溶液维持所述反应混合物的低盐浓度,且其中所述盐浓度产生比反应温度低至少10℃的引物的熔融温度(T |
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搜索关键词: | 低盐 条件下 等温 扩增 | ||
【主权项】:
扩增核酸的方法,其包括:a) 提供靶向核酸模板;b) 使所述靶向核酸模板与包含具有链替代活性的DNA聚合酶、脱氧核糖核苷三磷酸酯(dNTP)混合物、具有3’端和5’端的引物、分子拥挤剂和缓冲溶液的反应混合物接触,其中所述缓冲溶液维持所述反应混合物的盐浓度在1mM和75mM之间;和c) 在等温扩增条件下在恒定反应温度下扩增所述靶向核酸模板,其中所述盐浓度使所述引物的熔融温度(Tm)比所述反应温度低至少10℃。
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