[发明专利]一种利用重组大肠杆菌制备鸡白介素2的方法在审
| 申请号： | 201510411959.9 | 申请日： | 2015-07-14 |
| 公开（公告）号： | CN105154497A | 公开（公告）日： | 2015-12-16 |
| 发明（设计）人： | 侯伟宏;苏建东;杨保收;付旭彬;梁武 | 申请（专利权）人： | 天津瑞普生物技术股份有限公司 |
| 主分类号： | C12P21/02 | 分类号： | C12P21/02;C07K14/55;C07K1/18;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京金智普华知识产权代理有限公司 11401 | 代理人： | 李明卓 |
| 地址： | 300308 天津市滨海新区空港*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种利用重组大肠杆菌制备鸡白介素2的方法，所述重组大肠杆菌专指已经整合有鸡白介素2表达基因的基因重组大肠杆菌。该表达系统所表达的鸡白介素2蛋白在大肠杆菌中以包涵体的形式表达，但较高的表达量及后续的简易复性、纯化工艺，弥补了这一劣势，具有产量、复兴率及回收率高的优点，且生产周期短，成本低，为鸡白介素2的规模化生产奠定了良好的基础。本发明针对该表达系统的自身特性匹配了特定的工艺条件，通过对蛋白变性、复性以及纯化方法的创新设计使得利用该方法能够高效的表达鸡白介素2并能获得高纯度蛋白，具有突出的技术优势。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 重组 大肠杆菌 制备 白介素 方法 | ||
【主权项】：
一种利用重组大肠杆菌制备鸡白介素2的方法，其特征在于包括以下步骤：1)以异丙基‑β‑D‑硫代吡喃半乳糖苷为诱导物对重组大肠杆菌进行诱导表达，诱导浓度为0.8～1.0mmol/L，诱导温度为30～37℃，诱导表达时间为4～6小时；2)取步骤1)诱导表达后的菌体，裂解获得包涵体，加入变性缓冲液溶解变性，而后再加入复性缓冲液进行稀释复性；3)取步骤2)复性后的蛋白执行层析纯化。
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