[发明专利]一种缺齿蓑藓ISSR‑PCR分子标记方法有效
| 申请号： | 201510399129.9 | 申请日： | 2015-07-08 |
| 公开（公告）号： | CN104962638B | 公开（公告）日： | 2017-11-21 |
| 发明（设计）人： | 刘小慧;詹玲;陈云辉;刘晔彤;邹满钰;蔡锦蓉;吴倩倩;郭水良 | 申请（专利权）人： | 上海师范大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 上海科盛知识产权代理有限公司31225 | 代理人： | 赵志远 |
| 地址： | 200234 *** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明涉及一种缺齿蓑藓ISSR‑PCR分子标记方法，包括以下步骤1)提取缺齿蓑藓的基因组DNA，2)进行ISSR‑PCR扩增；步骤2)进行ISSR‑PCR扩增的反应体系为30μL反应体系中含有10×LAPCR缓冲液3μL，模板DNA50ng，Mg2+为1.5mmol/L，dNTP为0.25mmol/L，Taq酶为1.5U，引物为0.5μmol/L。以引物UBC834为例所述ISSR扩增的条件为94℃退火4min，然后94℃45S、53℃45S、72℃1min45个循环，最后72℃延伸10min。与现有技术相比，本发明所建立的缺齿蓑藓ISSR‑PCR反应体系扩增出的条带稳定性高，清晰度高，具有很高的多态性的特点。弥补了国内对缺齿蓑藓遗传多样性研究的不足，发明的成果可用于缺齿蓑藓遗传关系、分子标记以及生物地理学方面的研究具有很大的科学价值和应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 缺齿蓑藓 issr pcr 分子 标记 方法 | ||
【主权项】：
一种缺齿蓑藓ISSR‑PCR分子标记方法，其特征在于，包括以下步骤：1)提取缺齿蓑藓的基因组DNA；2)进行ISSR‑PCR扩增；步骤2)进行ISSR‑PCR扩增的反应体系为：30μL反应体系中含有10×LA PCR缓冲液3μL，模板DNA50ng，Mg2+为1.5mmol/L，dNTP为0.25mmol/L，Taq酶为1.25U，引物为0.5μmol/L，所述的引物序列如SEQ ID No.5所示；进行ISSR‑PCR扩增的条件为：94℃退火4min，然后94℃45s、53℃45s、72℃1min 40个循环，最后72℃延伸10min，进行ISSR‑PCR扩增的循环数为40。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于上海师范大学，未经上海师范大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201510399129.9/，转载请声明来源钻瓜专利网。
