[发明专利]一种自发酵液提取氨基葡萄糖的方法

摘要

本发明公开了一种自发酵液提取氨基葡萄糖的方法，包括发酵液絮凝、过滤，双效浓缩，粗品制备，精品制备等步骤。本发明工艺简单、方便、收率高。

主权项

一种自发酵液提取氨基葡萄糖的方法，其特征是：包括下列步骤：（一）发酵液絮凝、过滤（1）絮凝剂配制取絮凝剂聚丙烯酸钠300g加入4L蒸馏水中，加热至55～60℃，浸泡溶涨，2h后开搅拌溶解，加入蒸馏水6L，使其溶解均匀，配成10L3%的粘稠状液体，再将3%的粘稠状液体加入30L蒸馏水中，加热至55～60℃，搅拌1h，加入蒸馏水60L，使其溶解稀释，配成100L0.3%的稀释液，备用；（2）发酵液絮凝取发酵液1000L，发酵产率92.28g/L，发酵液干物质含量11.36%，含N‑乙酰氨基葡萄糖92.28㎏；发酵培养终止后，夹层升温至80℃，保温10～15min，灭活，降温至60℃。用盐酸调pH至3.5～4.0，开动搅拌，转速控制在60～80rpm，将上述配制的100L0.3%的絮凝剂稀释液加入发酵液中，使其与发酵液充分混合，当大量絮状物产生时，立即停止搅拌，自然混凝后形成菌体蛋白絮团悬浮于液体中；发酵液絮凝后体积为1182L，乙酰氨基葡萄糖含量为77.76g/L ，含乙酰氨基葡萄糖91.91㎏，絮凝收率为99.6%；（3）过滤（a）板框过滤絮凝后的发酵液经板框过滤得到滤液1098L，湿菌体78.58㎏；用蒸馏水洗涤菌体，得洗水150L，合并滤液、洗水合计1248L，乙酰氨基葡萄糖含量为72.26g/L ，滤液中含乙酰氨基葡萄糖90.18㎏，过滤收率为98.12%；洗涤后的菌体经闪蒸干燥，得干菌体24.2㎏，蛋白质含量为72.56%；  （b）陶瓷膜过滤板框滤液再经孔径为50nm陶瓷膜过滤，去除大分子胶原蛋白及色素，过滤温度40～50℃，膜进口压力为0.22～0.28MPa，膜出口压力为0.12～0.18MPa，膜通量为50～80L/㎡·h，滤后体积为1622L, 乙酰氨基葡萄糖含量为54.78g/L ，滤液中含乙酰氨基葡萄糖88.85㎏, 膜滤收滤为98.53%；（二）双效浓缩1622L膜滤液经双效浓缩器浓缩，一效蒸发温度80～90℃，二效蒸发温度65～75℃，蒸发1326L水分，得浓缩液296L，乙酰氨基葡萄糖含量为296.2g/L，含乙酰氨基葡萄糖87.84㎏，浓缩收率为98.86%，蒸馏水回收；（三）粗品制备（1）盐酸水解：将浓缩液296L与浓缩液等体积30%盐酸加入带有冷凝回流装置的反应釜中，80℃回流水解4h；（2）水解液真空浓缩：控制温度65～70℃，真空度‑0.06～‑0.07MPa，浓缩至142L，氨基葡萄糖盐酸盐含量为596.5g/L，含氨基葡萄糖盐酸盐84.70㎏，水解收率为96.43%；回收盐酸用于乙酰氨基葡萄糖浓缩液水解；（3）搅拌结晶：搅拌转速30rpm，降温至5～10℃，结晶时间5～6h，沉淀4h；（4）离心：离心得氨基葡萄糖盐酸盐粗品104.89㎏，氨基葡萄糖盐酸盐含量为72.35%，含氨基葡萄糖盐酸盐75.89㎏，收滤89.6%；离心所得母液加入浓盐酸用于乙酰氨基葡萄糖浓缩液水解；（四）精品制备（1）脱色：粗品加入300㎏蒸馏水，加热至65～70℃使其溶解，加入药用活性炭1.5㎏，搅拌脱色30min；（2）过滤：脱色液经板框过滤，滤液再经0.2μ精过滤器超滤，超滤液透光率达90%以上；活性炭回收后、经再生使用。（3）滤液真空浓缩：控制温度65～70℃，真空度‑0.06～‑0.07MPa，浓缩至110.49L，氨基葡萄糖盐酸盐含量为654.1g/L，含氨基葡萄糖盐酸盐72.27㎏，精制收率为95.23%；（4）结晶、干燥搅拌结晶：搅拌转速30rpm，降温至5～10℃，结晶时间5～6h，沉淀4h；离心：离心得氨基葡萄糖盐酸盐湿晶体79.66㎏；母液加入浓盐酸用于乙酰氨基葡萄糖浓缩液水解；真空干燥：干燥温度60℃，干燥8h，得到白色氨基葡萄糖盐酸盐70.89㎏，含量为98.56%，总收滤为75.71%，产品为白色结晶。