[发明专利]一种具有抑制神经细胞凋亡作用的金纳米粒复合物及其应用

摘要

本发明提供了一种具有抑制神经细胞凋亡作用的金纳米粒复合物及其应用。该金纳米粒复合物是将巯基化壳聚糖（TCTS）修饰到金纳米粒子（GNP）表面，再静电吸附干扰α‑突触核蛋白合成的pDNA，最后采用光接枝的方法接枝神经生长因子（NGF）后得到。本发明将成功合成的金纳米粒复合物作用于神经细胞，发现该复合物能够明显的抑制该细胞的凋亡，对帕金森病体外细胞模型的凋亡有抑制作用，这将是从继手术治疗和化学药物治疗之后出现的又一个治疗帕金森病的方法和新药物，对于该疾病的治疗和研究有很大的指导意义。

主权项

一种具有抑制神经细胞凋亡作用的金纳米粒复合物的制备方法，其特征在于，步骤如下：S1.制备壳聚糖/金纳米粒复合物S11.按照冰醋酸：巯基化壳聚糖=20～25：1的质量比例，将冰醋酸加到巯基化壳聚糖中，然后加入15～20倍体积的超纯水；S12.按照巯基化壳聚糖：HAuCl4·3H2O=1：2～4的质量比例，将HAuCl4·3H2O加入S11得到的混合液中；S13.再按照HAuCl4·3H2O：NaBH4=1：1～3的摩尔比例， 将NaBH4加入到S12得到的混合液中进行反应，对反应液进行透析，得到CTS@GNP水溶液；S2.制备神经生长因子（NGF）/质粒DNA（pDNA）/壳聚糖/金纳米粒复合物S21.将带负电荷的pDNA与带正电荷的壳聚糖/金纳米粒复合物按4～1：1～2质量比混合，然后在4℃或者常温下孵育20～30min，获得CTS@GNP‑pDNA；S22.按照NGF：二甲基甲酰胺（DMF）：叠氮苯胺盐酸盐（AAH）=3：20：5～8的体积比，将NGF溶解在二甲基甲酰胺PBS溶液中，在避光下加入叠氮苯胺盐酸盐，冰浴中搅拌反应24～48h；然后用超滤管对反应产物进行纯化后，加入PBS溶解，得到NGF‑AAH；S23.将CTS@GNP‑pDNA与NGF‑AAH的混合物在紫外灯下反应5～20s，并用超滤管对产物进行纯化，得到神经生长因子/质粒DNA/壳聚糖/金纳米粒复合物，即所述的具有抑制神经细胞凋亡作用的金纳米粒复合物；步骤S21所述带负电荷的pDNA为能够干扰α‑突触核蛋白合成的pDNA。