[发明专利]一种利用酵母菌评价油田钻井液生物毒性的方法在审
| 申请号： | 201410587757.5 | 申请日： | 2014-10-28 |
| 公开（公告）号： | CN105548461A | 公开（公告）日： | 2016-05-04 |
| 发明（设计）人： | 姚新武;张霖;王领民;廖莎;樊亚超;孙启梅;张全 | 申请（专利权）人： | 中国石油化工股份有限公司;中国石油化工股份有限公司大连石油化工研究院 |
| 主分类号： | G01N33/00 | 分类号： | G01N33/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100728 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用酵母菌评价油田钻井液生物毒性的方法，主要是通过多次传代培养获得活性稳定的酵母菌，将其培养至稳定期后期收集并离心，经重悬后制备成酵母菌液；然后将上述酵母菌液进行不连续密度梯度离心，收集包含酵母菌的中间层不连续密度梯度溶液；再将中间层不连续密度梯度溶液直接稀释制备成酵母菌悬液，或者将其制成冻干粉剂，使用前将其复溶制备成酵母菌悬液用于生物毒性评价。本发明方法采用酵母菌作为实验生物，可以在较短的反应时间内灵敏高效、稳定准确的评价油田钻井液的生物毒性，能够满足油田开发及生产中对快速评价油田钻井液生物毒性的需求。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 酵母菌 评价 油田 钻井 生物 毒性 方法 | ||
【主权项】：
一种利用酵母菌评价油田钻井液生物毒性的方法，其特征在于包括如下内容：（1）通过多次传代培养获得活性稳定的酵母菌，将其培养至稳定期后期收集并离心，经重悬后制备成酵母菌液；（2）将上述酵母菌液进行不连续密度梯度离心，收集包含酵母菌的中间层不连续密度梯度溶液；（3）将中间层不连续密度梯度溶液直接稀释制成酵母菌悬液，或者将其制成冻干粉剂，使用前将其复溶制成酵母菌悬液用于钻井液生物毒性评价；（4）使用标准毒性物质对酵母菌的生物毒性敏感性进行校正，同时确定油田钻井液对酵母菌的生物毒性分级指标；（5）将酵母菌制备成一定菌体浓度的酵母菌悬液，并按浓度梯度制备油田钻井液测试样品；（6）将酵母菌悬液与油田钻井液测试样品接触一定时间，通过染色法检测各浓度油田钻井液测试样品对酵母菌的致死率；（7）计算油田钻井液测试样品对酵母菌的半数有效浓度（EC50），根据生物毒性分级指标确定油田钻井液生物毒性等级。
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