[发明专利]汉城型汉坦病毒的Taqman探针荧光定量快速检测方法

摘要

本发明公开了汉城型汉坦病毒的Taqman探针荧光定量快速检测方法，上游引物序列为：5’-CAGCAGAAATCCCTCTTGTCC-3’；下游引物序列为：5’-TGGGTTTGTGAGATGCCTTTTA-3’；探针序列为：5′-fam+ACAGATAATGCTCATGGCGTTGGGA+tamara-3′；取200ul离心管，利用移液器依次加入PremixExTapTM(2×)10.0μl，上游引物0.4μl，下游引物0.4μl，荧光探针溶液0.8μl，模板DNA2.0μl，灭菌蒸馏水6.4μl，总体积共计20.0μl，放入离心机瞬时离心，将离心管放入荧光定量PCR仪进行检测。本发明方法检测精度高，所需时间短。

主权项

汉城型汉坦病毒的Taqman探针荧光定量快速检测方法，其特征在于按照以下步骤进行：步骤1：荧光定量PCR引物和探针设计；根据已克隆和测序的汉城型汉坦病毒M基因序列设计荧光定量PCR引物和探针，序列如下：上游引物序列为：5’‑CAGCAGAAATCCCTCTTGTCC‑3’；下游引物序列为：5’‑TGGGTTTGTGAGATGCCTTTTA‑3’；探针序列为：5′‑fam+ACAGATAATGCTCATGGCGTTGGGA+tamara‑3′；步骤2：取200ul离心管，利用移液器依次加入PremixExTapTM(2×)10.0μl，上游引物0.4μl，下游引物0.4μl，荧光探针溶液0.8μl，模板DNA2.0μl，灭菌蒸馏水6.4μl，总体积共计20.0μl，放入离心机瞬时离心，将离心管放入荧光定量PCR仪进行检测。