[发明专利]一种磷脂酶A2突变体及其制备方法

摘要

本发明涉及一种磷脂酶A₂突变体及其制备的方法，其技术方案是利用重组DNA技术定点突变来源于天蓝色链霉菌的野生型磷脂酶A₂的Glu37、Asp78的氨基酸残基，得到活力较高的磷脂酶A₂基因，然后将高活力磷脂酶A₂基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统(包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统)中表达，得到产高活力磷脂酶A₂的重组菌株，表达后，检测高活力磷脂酶A₂的比酶活较野生型磷脂酶A₂提高13.7％，其中枯草芽孢杆菌高活力磷脂酶A₂重组菌发酵后磷脂酶A₂的酶活可达到53.5U/ml，毕赤酵母游离表达高活力磷脂酶A₂重组菌的酶活可达106.4U/ml，毕赤酵母细胞表面展示高活力磷脂酶A₂全细胞催化剂的酶活可达260U/(g·干细胞)。

主权项

一种磷脂酶A₂突变体，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO：8所示。