[发明专利]LC-MS研究稻瘟病菌代谢组学的样品制备及检测方法

摘要

本发明公开了一种基于LC-MS研究稻瘟病菌代谢组学的样品制备法，包括稻瘟病菌菌丝样品的培养、过滤收集、液氮灭活处理、冷冻干燥；冻干后的菌丝块于-70℃冷藏作为样品备用。本发明还同时提供了利用上述样品进行的检测法，将样品研磨破碎后进行溶剂提取；提取完毕后，离心，所得上清过0.22μm的有机相微孔滤膜后进行上机检测：选用C18色谱柱（2.1×100mm，1.8μm）；进样量2μL；柱温60℃；流动相组成为含0.1%FA的水和含0.1%FA的乙腈，流速0.4mL/min；质谱采用ESI（+）电离方式，质量扫描范围100～1100。采用本发明的提取及检测方法能得到较好的TIC图。

主权项

基于LC‑MS研究稻瘟病菌代谢组学的样品制备法，其特征是：包括稻瘟病菌菌丝样品的培养、过滤收集、液氮灭活处理、冷冻干燥；所述稻瘟病菌菌丝样品的培养为：将稻瘟病菌的菌丝组织于CM液体培养基中黑暗摇菌培养3～4d，培养温度为25.5～26.5℃，转速为100～200rpm；得菌丝培养物；所述过滤收集为：将菌丝培养物通过抽滤装置收集到干净的滤纸上并抽沥干；所述液氮灭活处理为：将附有菌丝的滤纸取出折成小纸包，投入到液氮中速冻3～5min；所述冷冻干燥为：将经灭活处理后的菌丝小包于‑35～‑45℃的低温下真空冷冻2～3天；从而确保菌丝组织的含水率≤3%；冻干后的菌丝块于‑70℃冷藏作为样品备用。