[发明专利]HLA-B*58:01等位基因检测方法及其试剂盒无效
| 申请号： | 201410040172.1 | 申请日： | 2014-01-27 |
| 公开（公告）号： | CN103805701A | 公开（公告）日： | 2014-05-21 |
| 发明（设计）人： | 刘志文;肖伟明;阙秋华;孙祖勇 | 申请（专利权）人： | 希斯奇生物医药（上海）有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 上海思微知识产权代理事务所(普通合伙) 31237 | 代理人： | 许晓琳 |
| 地址： | 200233 上海市徐汇区*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种HLA-B*58:01等位基因检测方法，包括：提供待测样品、核酸扩增体系和荧光检测体系的混合物；通过扩增反应循环扩增靶多核苷酸；使荧光发生基团与被扩增的靶多核苷酸序列间接结合；测定荧光发生基团所产生的荧光量，从而确定靶多核苷酸的存在及其相对量。本发明还公开了一种测定上述等位基因的试剂盒，包括分别装有反应液1、反应液2、反应液3、EZ Taq酶混合液、标准液1、标准液2的多个密封离心管，分隔并集中包装这些离心管的试剂盒。本试剂盒及检测方法操作简便，耗时短，特异性强，灵敏度高。可广泛应用于人HLA-B*58:01等位基因的检测和临床上规避HLA-B*58:01等位基因型患者因使用别嘌呤醇引起的严重皮肤不良反应。 | ||
| 搜索关键词： | hla 58 01 等位基因 检测 方法 及其 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种HLA‑B*58:01等位基因检测方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）提供包括待测样品、核酸扩增体系和荧光检测体系的混合物；（2）通过扩增反应循环扩增待测样品中的靶多核苷酸；（3）使所述荧光检测体系中的荧光发生基团与被扩增的靶多核苷酸序列间接结合；（4）测定荧光发生基团所产生的荧光量，从而确定靶多核苷酸的存在及其相对量；所述核酸扩增体系由如下组分组成：耐热DNA聚合酶、2’‑脱氧核苷三磷酸、能够与靶多核苷酸的第一条链结合的正向引物a和能够与靶多核苷酸的第二条链结合的反向引物a，能够与靶多核苷酸的第一条链结合的正向引物b和能够与靶多核苷酸的第二条链结合的反向引物b；所述荧光检测体系是能够与靶多核苷酸结合并且两端分别结合有荧光发生基团和荧光淬灭基团的两条寡核苷酸探针。
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