[发明专利]人工生物发光酶有效
申请号: | 201380056095.2 | 申请日: | 2013-09-18 |
公开(公告)号: | CN104781401B | 公开(公告)日: | 2018-06-05 |
发明(设计)人: | 金诚培;鸟村政基;田尾博明;中里哲也 | 申请(专利权)人: | 独立行政法人产业技术综合研究所 |
主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12Q1/02;C12Q1/66;G01N21/76;G01N33/53;G01N33/531;G01N33/532 |
代理公司: | 北京尚诚知识产权代理有限公司 11322 | 代理人: | 龙淳;谢弘 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | 本发明涉及以通过基于数据库中的来自桡脚类的荧光素酶序列的氨基酸相似性的比对而提取的人工的氨基酸序列为基础的一系列的人工荧光素酶的创立,提供一种发光特性为高亮度、且发光稳定性高、向长波长侧迁移的光谱。本发明中,将数据库中的来自桡脚类的荧光素酶序列基于氨基酸相似性进行比对,以对应序列上的每个位置上的频率高的氨基酸为中心进行提取,构建人工的氨基酸序列,创立一系列的人工的荧光素酶群(ALuc)。此时,存在于氨基酸序列中的前半部和后半部的酶活性区域也一并通过相似性进行比对,两者中的氨基酸的相似性也提高。评价所得到的荧光素酶(ALuc)群的各个酶的亮度和发光稳定性,将结果好的ALuc的氨基酸序列反馈并再构建氨基酸序列,由此来合成性能更高的荧光素酶(ALuc)群。这些ALuc类具有发光亮度的高亮度化、且发光稳定性的提高、或者发光光谱向长波长侧迁移等前所未有的优异的发光特性。并且,通过使用本发明的人工荧光素酶(ALuc)类,能够提供在提高了计量功能的生物发光探针、双杂交检测、发光胶囊等中前所未有的优异的生物鉴定体系。 | ||
搜索关键词: | 荧光素酶 氨基酸序列 发光稳定性 人工的 比对 氨基酸相似性 发光特性 长波长 氨基酸 构建 发光 数据库 迁移 酶活性区域 氨基酸序 发光光谱 合成性能 计量功能 人工生物 生物发光 生物鉴定 发光酶 后半部 亮度化 前半部 双杂交 光谱 探针 胶囊 反馈 检测 | ||
【主权项】:
一种多肽,其特征在于:由序列号11~17、24~28、32~33或35~36中任一项所记载的氨基酸序列构成,并且具有桡脚类荧光素酶活性。
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