[发明专利]人工生物发光酶

权利要求书

1.一种多肽，其特征在于：

由序列号11～17、24～28、32～33或35～36中任一项所记载的氨基酸序列构成，并且具有桡脚类荧光素酶活性。

2.一种编码权利要求1所述的多肽的核酸。

3.一种以能够表达的方式插入了权利要求2所述的核酸的表达载体。

4.一种以能够表达的方式导入了权利要求2所述的核酸的转化细胞。

5.一种报告蛋白，其用于报告分析法，所述报告蛋白的特征在于：

包括权利要求1所述的多肽。

6.一种发光性融合蛋白，其特征在于：

含有权利要求5所述的报告蛋白，并且含有靶蛋白或识别靶蛋白的肽。

7.如权利要求6所述的发光性融合蛋白，其特征在于：

在报告蛋白的C末端侧结合有膜定位信号(MLS)，靶蛋白作为载入物插入两者之间。

8.如权利要求7所述的发光性融合蛋白，其特征在于：

所述被插入的靶蛋白是荧光蛋白质或荧光素酶。

9.如权利要求7所述的发光性融合蛋白，其特征在于：

所述被插入的靶蛋白是使细胞膜形态变化的多肽或含有该多肽识别的氨基酸序列的多肽。

10.一种表达载体，其特征在于：

包含编码权利要求6～9中任一项所述的发光性融合蛋白的基因。

11.一种导入了权利要求10所述的表达载体的转化细胞。

12.一种非疾病诊断目的的报告分析法，用于分析对应于外部刺激的细胞内的靶基因的表达位置、表达时期或表达量，所述报告分析法的特征在于：

使用权利要求11所述的转化细胞。

13.如权利要求12所述的分析法，其特征在于：

所述分析法是报告基因检测法或双杂交检测法。

14.一种生物发光探针，用于测定配体结合性蛋白的配体活性，所述生物发光探针的特征在于：

由融合蛋白构成，

所述融合蛋白含有被分为N末端侧和C末端侧两部分的权利要求5所述的报告蛋白，并且含有配体结合性的靶蛋白和识别配体与靶蛋白结合时的立体结构变化的多肽。

15.一种表达载体，其为用于测定配体结合性蛋白的配体活性的表达载体，所述表达载体的特征在于：

编码权利要求14所述的生物发光探针的核酸处于能够在细胞内表达该核酸的调控序列的调控之下。

16.一种导入了权利要求15所述的表达载体的转化细胞。

17.一种非疾病诊断目的的、被检细胞内的配体结合性蛋白的配体活性的检测方法，其特征在于：

使用权利要求15所述的表达载体。

18.一种非疾病诊断目的的生物发光成像法，其特征在于：

使用权利要求15所述的表达载体，观察被检细胞内的配体结合性蛋白的配体活性。