[发明专利]五价轮状病毒疫苗抗原血清型的检测方法

摘要

本发明涉及五价轮状病毒疫苗抗原血清型的检测方法，通过提取样品总RNA，应用一步法RT-PCR扩增样品中不同血清型的轮状病毒RNA，进行血清型的鉴别，其中包括5对寡聚核苷酸引物（SEQ ID No.1-10），分别针对五价轮状病毒疫苗中G1血清型、G2血清型、G3血清型、G4血清型和G9血清型抗原扩增得到特异性单一条带PCR产物，产物大小分别为337bp、425bp、326bp、253bp、570bp，无交叉反应。本发明的方法具有灵敏度高、特异性好、快速简便等特点，可以准确检测五价轮状病毒疫苗中抗原血清型并且判断病毒样品中是否存在混杂现象，主要应用于五价轮状病毒疫苗开发过程中毒种纯度的监测。

主权项

用于RT‑PCR检测五价轮状病毒疫苗抗原血清型的引物对，其特征在于，所述引物对选自引物对1～5中的至少一种：引物对1：以轮状病毒G1血清型VP7基因为靶基因的引物对上游引物5′‑CTGTAGCATTATTTGCTTTGAC‑3′下游引物5′‑CATATCTAATTCAAGACTTTGG‑3′；引物对2：以轮状病毒G2血清型VP7基因为靶基因的引物对上游引物5′‑TAACAGCACCATTTGTAAGG‑3′下游引物5′‑ACAAACTTTTACCGTGCAGTC‑3′；引物对3：以轮状病毒G3血清型VP7基因为靶基因的引物对上游引物5′‑AGTTATACTGTCACCACTCCTT‑3′下游引物5′‑TTTCCAGTTGCAGTGTAGCG‑3′；引物对4：以轮状病毒G4血清型VP7基因为靶基因的引物对上游引物5′‑ACTTAGATTCGTTTCTGGTGAG‑3′下游引物5′‑TGCCAGTTTTTCGCTATCA‑3′；引物对5：以轮状病毒G9血清型VP7基因为靶基因的引物对上游引物5′‑CTCCTTTTGCTTATCGTCATTG‑3′下游引物5′‑TACCACTAAGTTTTCACTTGCG‑3′。