[发明专利]一种双试剂法测定尿酸含量试剂盒的配方

摘要

一种双试剂法测定尿酸试剂盒的配方；将抗坏血酸氧化酶、辣根过氧化物酶及其辅助显色底物配制在pH6.5～7.0的磷酸盐缓冲液中为试剂1，将尿酸酶及过氧化物酶显色底物配制在pH8.0～9.6硼酸-硼砂缓冲液中为试剂2；应用时调节试剂1和试剂2的比例使最终反应体系pH为7.2～7.5以保障显色产物稳定性，据此混合比例再调节试剂1和试剂2中各种酶及其它有效成分的初始浓度，使各种有效成分在最终反应体系的浓度同时达到要求。这种试剂盒配方使得所用尿酸酶、抗坏血酸氧化酶和过氧化物酶的稳定性都提高而降低成本或延长试剂盒的货架寿命，并保障分析性能。

主权项

1.一种双试剂法测定尿酸含量试剂盒的配方，其特征在于：(1)用尿酸酶和偶联过氧化物酶反应测定显色产物吸收确定尿酸量，用抗坏血酸氧化酶消除样品中抗坏血酸即维生素C的干扰；(2)将抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶及辅助显色物质，加防腐剂和其它辅助成分配制在pH6.5～7.0的磷酸盐缓冲液中为试剂1；(3)将尿酸酶和N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐配制在pH8.0～9.6硼酸-硼砂缓冲液中，加防腐剂为试剂2；(4)应用时，试剂1和试剂2混合的比例以最终反应体系pH在7.2～7.5之间为原则进行设置；试剂1和试剂2的pH不同时，其所含各种酶的初始浓度相应改变，使最终反应体系各种酶浓度变化小于10％即保持一致；试剂1和试剂2的pH在所述范围内变化时，二者在最终反应体系的混合比例如下表：(5)应用时，加入样品体积占最终反应混合物总体积的1～3％；(6)应用时，先将试剂1和样品混合，摄氏20～37度反应3到8分钟测定吸收为起点吸收；再加入满足最终pH要求的试剂2，混合后相同温度再反应5到15分钟；测定吸收并扣除起点吸收，得到尿酸氧化所生成过氧化氢被用于氧化显色底物所得产物吸收；(7)以已知浓度尿酸为标准品，制备所得吸收对样品中尿酸浓度的响应曲线；据响应曲线和所测定的吸收推算样品中尿酸浓度。