[发明专利]具有靶向性四氧化三铁-卟啉复合纳米粒子的制备方法

摘要

具有靶向性四氧化三铁-卟啉复合纳米粒子的制备方法，本发明涉及复合纳米粒子的制备方法。本发明要解决光动力学诊断与治疗存在光敏剂荧光信号，强度不强，肿瘤组织的选择性摄取不高，导致光敏剂在正常组织中的累积效应高，甚至在暗光下发生光化反应的问题。方法：一、制备二氧化硅包覆的磁性四氧化三铁纳米粒子；二、制备卟啉化合物；三、制备硅烷试剂键联的卟啉化合物；四、制备卟啉-叶酸化合物；五、制备具有靶向性四氧化三铁-卟啉复合纳米粒子。本发明基于磁性四氧化三铁卟啉复合纳米粒子具有集磁流体热疗、磁靶向性和光动力学疗法于一体作为肿瘤的治疗手段。本发明用于制备具有靶向性四氧化三铁-卟啉复合纳米粒子。

主权项

1.具有靶向性四氧化三铁-卟啉复合纳米粒子的制备方法，其特征在于具有靶向性四氧化三铁-卟啉复合纳米粒子的制备方法，具体是按照以下步骤进行的：一、采用FeCl₃·6H₂O配制浓度为0.1mol/L的FeCl₃溶液，采用FeSO₄·4H₂O配制浓度为0.1mol/L的FeSO₄溶液；在氮气保护和机械搅拌条件下，按照Fe³⁺与Fe²⁺摩尔比为2:1，将100mL浓度为0.1mol/L的FeCl₃溶液和50mL浓度为0.1mol/L的FeSO₄溶液混合，得到FeCl₃和FeSO₄的混合溶液，再采用浓度为1mol/L的盐酸调节pH值为5，然后加入质量浓度为25%的氨水溶液，直到混合溶液出现黑色沉淀，再继续搅拌1h，得到固液混合液；在外加磁场作用下，将固液混合液的上层废液倾去，再用去离子水冲洗沉淀物，得到Fe₃O₄磁性纳米粒子；将Fe₃O₄磁性纳米粒子分散在浓度为0.4mol/L的NaCl水溶液中至Fe₃O₄磁性纳米粒子的浓度为7.5mg/mL，得到混液A，然后取10mL混液A加入30mL溶有1.5mL四乙氧基硅烷的乙醇溶液中，然后依次加入30mL去离子水、30mL无水乙醇和2.5mL质量浓度为28%的氨水，再继续搅拌90min，然后通过磁分离除去上层清夜，再用二次蒸馏水和乙醇混合液洗涤磁性纳米粒子3次，得到二氧化硅包覆的磁性四氧化三铁纳米粒子；二、将150mg四羟基苯基卟啉化合物、2g无水碳酸钾和40mLN,N-二甲基甲酰胺混合，利用装有冰盐水的磁力搅拌器搅拌10分钟，然后加入1.5mL的氯乙酰氯，在冰盐浴条件下继续反应4.5h，再加入90mL～110mL二次蒸馏水，然后用100mL二氯甲烷进行萃取，取下层溶液；将所得下层溶液用无水硫酸钠干燥24h，再用旋转蒸发仪蒸干溶剂，得到氯乙酰氯取代的不同卟啉化合物混合物，然后采用硅胶柱色谱进行分离，以纯的二氯甲烷为淋洗剂，得到第一色谱带的化合物，再以二氯甲烷和甲醇体积比为100:1的二氯甲烷和甲醇混合溶液为淋洗剂，得到第二色谱带的化合物，然后以二氯甲烷和甲醇体积比为100:1.5的二氯甲烷和甲醇混合淋洗剂为洗脱剂，得到第三色谱带的化合物，再以二氯甲烷和甲醇体积比为100:1.8的二氯甲烷和甲醇混合淋洗剂为洗脱剂，得到第四色谱带的化合物，.再以二氯甲烷和甲醇体积比为100:2.5的二氯甲烷和甲醇混合淋洗剂为洗脱剂，得到第五色谱带的化合物1，其中，化合物1的结构式为三、将100mg步骤二得到的化合物1、2g无水碳酸钾、1.5mL氯丙基三乙氧基硅烷和20mL四氢呋喃混合，在避光条件下磁力搅拌20h～28h，再过滤，然后减压蒸馏除去未反应的硅烷试剂和四氢呋喃，得到粗品硅氧烷卟啉；然后以硅胶为固定相，二氯甲烷和甲醇体积比为1:5的二氯甲烷和甲醇的混合溶液作为洗脱剂进行淋洗，收集第一色谱带的化合物，得到硅烷试剂键联的卟啉化合物，该卟啉化合物的结构式为四、在室温条件下将50mg步骤三得到的卟啉化合物和4g无水K₂CO₃溶解在30mLDMSO中，再加入40mg叶酸，在室温避光条件下磁力搅拌10h，再加入300mL的冰冻乙醚，然后在温度为-15℃～-22℃条件下抽滤，得到紫红色固体，再采用温度为-20℃的冰乙醚洗涤，得到叶酸键联的卟啉-叶酸化合物，该卟啉-叶酸化合物的结构式为五、将步骤一得到的二氧化硅包覆的磁性四氧化三铁纳米粒子通过超声分散到30mL醇和30mL去离子水的混合溶剂中，控制温度为60℃，在机械搅拌条件下，加入20mg步骤四得到的卟啉-叶酸化合物，然后控制温度为60℃反应2h，再通过磁分离，得到具有靶向性四氧化三铁-卟啉复合纳米粒子。