[发明专利]具有靶向性四氧化三铁-卟啉复合纳米粒子的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及复合纳米粒子的制备方法。

背景技术

肿瘤热疗已成为继手术、放疗、化疗之后的一种全新治疗肿瘤的“绿色疗法”。热疗不但对肿瘤细胞有直接的细胞毒效应，还可以和化疗、放疗联合使用，可以增强化疗、放疗的疗效，提高机体的免疫力，抑制肿瘤的转移。然而常用的热疗方法因其对肿瘤的靶向能力差,易导致治疗区周围组织的温度升高而产生损伤,在临床应用中受到限制，随着纳米技术的发展,德国学者Jordan提出一种新的热疗法—纳米磁流体热疗(magnetic fluid hyperthermia,MFH)治疗肿瘤取得了重要进展,此方法的优点就是靶向定位升温,即无磁粒子的组织不受损伤；另一发面，磁性纳米粒子的磁靶向性可以将键联在表面的卟啉类光敏剂累积在病灶部位，从而提高卟啉类光敏剂在病灶部位的累积效应。光动力学诊断与治疗是利用一些光敏药物可以优先富集于肿瘤部位，通过适当波长的光照射光敏药物，利用光敏药物的光动力反应对肿瘤进行诊断和治疗。通过检测光敏剂产生的荧光可检测肉眼无法观测到的早期癌或癌前病变，具有无创、快速、客观、可记录、可重复等特点，并可通过特征性荧光指示肿瘤的浸润程度，进行肿瘤的定位诊断，使对肿瘤的治疗更彻底。光动力学治疗是一种微创的肿瘤治疗方法，具有抗瘤谱广、适应症广、可多次重复治疗、能选择性杀伤肿瘤细胞，较大限度地保留正常器官和组织的功能；与化疗和放疗联合使用有一定的协同作用、光动力学疗法与手术联合使用，能缩小手术范围和减少术后复发等优点。然而光动力学诊断与治疗目前还存在一些缺点。比如：（1）最显著问题就是光敏剂荧光信号强度不强；（2）肿瘤组织的选择性摄取不高，导致光敏剂在皮肤等其它正常组织中的存在，甚至在暗光下也发生光化反应；（3）光敏药物一般为卟啉类衍生物，大多数水溶性不好，静脉注射后血液中药物浓度的波动常常不可避免。因此，只能在限定的时间内给药，且剂量有限，很难达到满意的疗效。

发明内容

本发明要解决光动力学诊断与治疗存在光敏剂荧光信号强度不强，肿瘤组织的选择性摄取不高，导致光敏剂在皮肤等其它正常组织中的累积效应高，甚至在暗光下也发生光化反应的问题，而提供的具有靶向性四氧化三铁-卟啉复合纳米粒子的制备方法。

具有靶向性四氧化三铁-卟啉复合纳米粒子的制备方法，具体是按照以下步骤进行的：

一、采用FeCl₃·6H₂O配制浓度为0.1mol/L的FeCl₃溶液，采用FeSO₄·4H₂O配制浓度为0.1mol/L的FeSO₄溶液；

在氮气保护和机械搅拌条件下，按照Fe³⁺与Fe²⁺摩尔比为2:1，将100mL浓度为0.1mol/L的FeCl₃溶液和50mL浓度为0.1mol/L的FeSO₄溶液混合，得到FeCl₃和FeSO₄的混合溶液，再采用浓度为1mol/L的盐酸调节pH值为5，然后加入质量浓度为25%的氨水溶液，直到混合溶液出现黑色沉淀，再继续搅拌1h，得到固液混合液；

在外加磁场作用下，将固液混合液的上层废液倾去，再用去离子水冲洗沉淀物，得到Fe₃O₄磁性纳米粒子；将Fe₃O₄磁性纳米粒子分散在浓度为0.4mol/L的NaCl水溶液中至Fe₃O₄磁性纳米粒子的浓度为7.5mg/mL，得到混液A，然后取10mL混液A加入30mL溶有1.5mL四乙氧基硅烷的乙醇溶液中，然后依次加入30mL去离子水、30mL无水乙醇和2.5mL质量浓度为28%的氨水，再继续搅拌90min，然后通过磁分离除去上层清夜，再用二次蒸馏水和乙醇混合液洗涤磁性纳米粒子3次，得到二氧化硅包覆的磁性四氧化三铁纳米粒子；

二、将150mg四羟基苯基卟啉化合物、2g无水碳酸钾和40mLN,N-二甲基甲酰胺混合，利用装有冰盐水的磁力搅拌器搅拌10分钟，然后加入1.5mL的氯乙酰氯，在冰盐浴条件下继续反应4.5h，再加入90mL～110mL二次蒸馏水，然后用100mL二氯甲烷进行萃取，取下层溶液；