[发明专利]犬细小病毒病毒样颗粒、其制备方法及应用有效
申请号: | 201310361428.4 | 申请日: | 2013-08-19 |
公开(公告)号: | CN103387996A | 公开(公告)日: | 2013-11-13 |
发明(设计)人: | 夏振强;金宏丽;郑文文;张渭蛟 | 申请(专利权)人: | 长春西诺生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/35 | 分类号: | C12N15/35;C12N15/866;C12N7/04;A61K39/23;A61P31/20 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王朋飞 |
地址: | 130012 吉*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | 本发明提供了一种犬细小病毒病毒样颗粒,其是根据昆虫细胞偏爱密码子,对犬细小病毒VP2基因进行优化,将优化后的VP2基因与昆虫表达载体连接,利用杆状病毒/昆虫细胞表达系统来生产犬细小病毒病毒样颗粒。将所述犬细小病毒病毒样颗粒与防腐剂和佐剂混合,即制备得到犬细小病毒性肠炎疫苗。本发明的犬细小病毒性肠炎疫苗具有产量高、生产成本低、免疫原性高、安全性好、便于大规模生产等优点,对犬细小病毒性肠炎具有良好的免疫及预防效果。 | ||
搜索关键词: | 细小 病毒 颗粒 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
犬细小病毒病毒样颗粒的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)根据昆虫细胞偏爱密码子对犬细小病毒VP2基因进行优化,得到优化的犬细小病毒VP2基因;(2)重组杆状病毒Bacmid质粒的构建:将优化的VP2基因插入到昆虫细胞表达载体pFastBac1中,转化大肠杆菌DH10Bac感受态细胞,提取阳性质粒即为重组杆状病毒Bacmid质粒;(3)重组杆状病毒的拯救:用重组杆状病毒Bacmid质粒转染昆虫细胞,拯救获得重组杆状病毒;(4)犬细小病毒病毒样颗粒的制备:将获得的重组杆状病毒按MOI=0.1接种昆虫细胞,4‑5天后收获上清,即得犬细小病毒病毒样颗粒。
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