[发明专利]一种快速准确检测大肠杆菌O157:H7活菌试剂盒及其检测方法无效
申请号: | 201310352563.2 | 申请日: | 2013-08-13 |
公开(公告)号: | CN103468797A | 公开(公告)日: | 2013-12-25 |
发明(设计)人: | 李林;杨晓慧;许恒毅;徐波 | 申请(专利权)人: | 无锡中德伯尔生物技术有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/10 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 李纪昌 |
地址: | 214174 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种大肠杆菌O157:H7的PCR的检测方法。本发明针对大肠杆菌O157:H7的rfbE基因,设计一对扩增634bp的特异性PCR引物,同时为防止PCR检测时PCR抑制剂存在引起的假阳性结果,在PCR体系中添加了一对扩增16SrRNA保守区域引物。主要采用磁珠富集的方法从实际样本中分离出目的菌。通过叠氮溴化丙锭(PMA)处理分离的大肠杆菌O157:H7以去除死菌的干扰。最后通过PCR扩增和电泳检测确定实际样本中是否受到大肠杆菌O157:H7的污染。本发明的检测方法具有灵敏度高、特异性强、检测时间短,操作过程简单,并且不会被食物样品中残留的DNA或死菌的干扰,同时也排除了实际样本中PCR抑制剂而引起的假阳性结果,使得检测结果准确可靠。 | ||
搜索关键词: | 一种 快速 准确 检测 大肠杆菌 o157 h7 试剂盒 及其 方法 | ||
【主权项】:
一种快速准确检测大肠杆菌O157:H7活菌试剂盒,其特征在于其含有rfbE上游引物:TCCATTTATACGGACATCCATrfbE下游引物:AAATTAATTCCACGCCAACCA16S rRNA上游引物:CCTACGGGAGGCAGCAGT 16S rRNA下游引物:CGTTTACGGCGTGGACTAC 。
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