[发明专利]一种跨膜输出蛋白基因选择克隆T载体及其应用

摘要

本发明公开了一种跨膜输出蛋白基因选择克隆T载体及其应用。T载体，通过如下方法构建：将阿拉伯糖启动子插入pMBL载体中β-内酰胺酶基因的上游，得到重组克隆载体；在所述重组克隆载体的β-内酰胺酶基因与启动子之间引入两个Xcm I酶切位点，得到前T载体；限制性内切酶Xcm I酶切所述的前T载体，回收线性化载体，得到所述的T载体。本发明还公开了所述T载体在体外筛选跨膜输出蛋白基因中的应用。本发明的T载体，相容性好，连接效率高，能够以直接克隆随机PCR产物的方式选择性地克隆和筛选含有信号肽序列的跨膜输出蛋白基因，且进行筛选跨膜输出蛋白基因时，只需构建一个基因文库，操作便捷、成本低。

主权项

一种T载体，其特征在于，通过如下方法构建：（1）将阿拉伯糖启动子插入pMBL载体中β‑内酰胺酶基因的上游，得到重组克隆载体；（2）在所述重组克隆载体的β‑内酰胺酶基因与启动子之间引入两个Xcm I酶切位点，得到前T载体；（3）限制性内切酶Xcm I酶切所述的前T载体，回收线性化载体，得到所述的T载体。