[发明专利]一种ssDNA-蛋白质酶法交联方法无效
申请号: | 201310261812.7 | 申请日: | 2013-06-27 |
公开(公告)号: | CN103361321A | 公开(公告)日: | 2013-10-23 |
发明(设计)人: | 王天文;马兴元;马飞;王平 | 申请(专利权)人: | 华东理工大学 |
主分类号: | C12N9/04 | 分类号: | C12N9/04;C12N15/70 |
代理公司: | 上海翼胜专利商标事务所(普通合伙) 31218 | 代理人: | 施春花;翟羽 |
地址: | 200237 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开一种ssDNA-蛋白质酶法交联方法,包括以下步骤:(1)制备proA*与目标蛋白的融合蛋白,proA*来源于噬菌体ΦX174;(2)融合蛋白与ssDNA交联,ssDNA含有识别和结合序列。利用proA*可以识别、切割并催化特定序列的ssDNA与自身酪氨酸残基通过形成酯键相偶联的特性,以LDH为模式蛋白建立蛋白质与ssDNA高效交联的通用方法。本发明交联时引入的蛋白proA*不但不会影响其活力,而且对保持酶的活力有一定的辅助作用。本发明所实施的交联反应是在反应缓冲液中通过融合蛋白对于底物DNA序列的识别实现的,本发明所提供的方法高效、快速、简单、经济,具有巨大的实用性与通用性。 | ||
搜索关键词: | 一种 ssdna 蛋白质 交联 方法 | ||
【主权项】:
一种ssDNA‑蛋白质酶法交联方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)制备proA*与目标蛋白的融合蛋白,所述proA*来源于噬菌体ΦX174;(2)融合蛋白与ssDNA交联,所述ssDNA含有识别和结合序列。
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