[发明专利]一种可同时检测多个HBV耐药突变位点的新方法有效
| 申请号： | 201310249437.4 | 申请日： | 2013-06-22 |
| 公开（公告）号： | CN103320531A | 公开（公告）日： | 2013-09-25 |
| 发明（设计）人： | 欧启水;刘灿;商红艳;曾勇彬;陈添彬 | 申请（专利权）人： | 福建医科大学附属第一医院 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人： | 蔡学俊 |
| 地址： | 350005 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 乙型肝炎病毒基因突变是导致病毒耐药的基础，现阶段的检测技术存在着较低的灵敏度、价格较贵、操作不够简便、数据分析工作量大或存在碱基错配等缺点。本发明提供了一种高灵敏度的COLD-PCR联合测序技术并将其应用于HBV已知和未知多个耐药突变的检测，具有高度灵敏、简便、价廉和实用的优点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 同时 检测 hbv 耐药 突变 新方法 | ||
【主权项】：
一种可同时检测多个乙型肝炎病毒耐药突变位点的检测方法，步骤为：1）设计和合成一对引物，如SEQ ID No.1‑2所示；2）提取乙型肝炎病毒DNA，并以步骤1所述的一对引物为扩增引物进行扩增，测定扩增产物的熔解温度Tm；依据熔解温度Tm，通过改变扩增变性温度确定关键变性温度Tc；3）通过Tc建立COLD‑PCR反应体系条件并反应得到COLD‑PCR产物；4）将COLD‑PCR产物进行sanger双向序列测定。
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