[发明专利]一种检测间充质干细胞分布的方法有效
| 申请号： | 201310189450.5 | 申请日： | 2013-05-21 |
| 公开（公告）号： | CN103243169A | 公开（公告）日： | 2013-08-14 |
| 发明（设计）人： | 俞家华;刘芬菊;袁小鹏;顾成;王洁;杨磊 | 申请（专利权）人： | 苏州大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 苏州创元专利商标事务所有限公司 32103 | 代理人： | 陶海锋 |
| 地址： | 215123 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种检测间充质干细胞分布的方法，包括将雄性动物间充质干细胞移植至雌性动物体内；然后提取基因组DNA并进行定量；以血红蛋白β亚单位基因为内参基因，SRY基因为目的基因，分别设定引物，然后进行定量聚合酶链式反应扩增；通过PCR产物的定量分析可以检测间充质干细胞在体内的分布。本发明开发的检测方法简单，移植前无需标记，不受时间和细胞表型变化的影响，也不受组织类型的限定；稳定性好，对间充质干细胞、机体影响小，检测结果准确，易于推广应用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 检测 间充质 干细胞 分布 方法 | ||
【主权项】：
一种检测间充质干细胞分布的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）将提取后的雄性动物间充质干细胞移植至雌性动物体内；（2）细胞移植后提取组织基因组DNA并进行定量：将样本在组织消化液中45～55℃消化0.5～20小时；然后将消化液加入到同体积的氯仿中，震荡，静置5～10分钟后离心分离，取上层液加入到同体积的异丙醇中，震荡，静置5～7分钟后离心分离，弃上清，用75%的乙醇溶液洗涤沉淀；用紫外光分光光度计在260 nm处对洗涤后的沉淀进行DNA定量； （3）聚合酶链反应及鉴定：以血红蛋白β亚单位基因为内参基因，SRY基因为目的基因，分别设定引物，然后进行定量聚合酶链式反应扩增；通过PCR产物的定量分析可以检测间充质干细胞在雌性动物体内的分布。
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