[发明专利]一种检测间充质干细胞分布的方法

权利要求书

1.一种检测间充质干细胞分布的方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）将提取后的雄性动物间充质干细胞移植至雌性动物体内；

（2）细胞移植后提取组织基因组DNA并进行定量：将样本在组织消化液中45～55℃消化0.5～20小时；然后将消化液加入到同体积的氯仿中，震荡，静置5～10分钟后离心分离，取上层液加入到同体积的异丙醇中，震荡，静置5～7分钟后离心分离，弃上清，用75%的乙醇溶液洗涤沉淀；用紫外光分光光度计在260 nm处对洗涤后的沉淀进行DNA定量； 

（3）聚合酶链反应及鉴定：以血红蛋白β亚单位基因为内参基因，SRY基因为目的基因，分别设定引物，然后进行定量聚合酶链式反应扩增；通过PCR产物的定量分析可以检测间充质干细胞在雌性动物体内的分布。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述雄性动物间充质干细胞来源于骨髓、脂肪或者皮肤组织。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述雄性动物间充质干细胞来源于骨髓组织。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述组织消化液包括三羟甲基氨基甲烷-盐酸100 mmol/L pH 8.0，NaCl 200 mmol/L，乙二胺四乙酸5 mmol/L，十二烷基硫酸钠2mg/ml以及蛋白酶K 0.1mg/ml。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述离心分离时的离心力为12000xg；时间为10min。