[发明专利]一种用于牛基因组位点特异性重组的RNA干扰载体及其构建方法和应用有效
| 申请号： | 201310037264.X | 申请日： | 2013-01-30 |
| 公开（公告）号： | CN103131723A | 公开（公告）日： | 2013-06-05 |
| 发明（设计）人： | 常惠芸;马延滨;邵军军;高闪电;赵付荣;丛国正;林彤;独军政 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;C12N5/071 |
| 代理公司： | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人： | 孙皓晨 |
| 地址： | 730046 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于牛基因组位点特异性重组的RNA干扰载体及其构建方法和应用，属于生物技术领域。本发明的干扰载体依次包括以下相连的各部分：HSV-TK表达元件、用于载体线性化的酶切位点、与牛的scaffold序列上游进行同源重组的同源重组臂1、人U6启动子序列、多克隆酶切位点、人U6终止子序列、含有PCMV启动子的新霉素抗性基因、与牛的scaffold基因下游进行同源重组的同源重组臂2、复制起始位点基因及氨苄青霉素抗性筛选基因。本发明的干扰载体实现了对牛源细胞基因组的精确打靶，并为筛选提供了方便，插入位点以及插入片段不影响染色体整体结构，不对基因组造成非研究性基因表达的影响，为研究提供了便利。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 基因组 特异性 重组 rna 干扰 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种用于牛基因组位点特异性重组的RNA干扰载体，其特征在于所述的干扰载体依次包括以下相连的各部分：HSV‑TK表达元件、用于载体线性化的酶切位点、与牛的scaffold序列上游进行同源重组的同源重组臂1、人U6启动子序列、多克隆酶切位点、人U6终止子序列、含有PCMV启动子的新霉素抗性基因、与牛的scaffold序列下游进行同源重组的同源重组臂2、复制起始位点基因以及氨苄青霉素抗性筛选基因，所述的牛的scaffold序列位于牛ITGB6基因以及PLA2R1基因之间，scaffold的GeneBank登录号为NW_003103838REGION:6735248..6760428。
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