[发明专利]酵母中生产古细菌蛋白酶的方法无效
| 申请号： | 201280054844.3 | 申请日： | 2012-11-05 |
| 公开（公告）号： | CN103930544A | 公开（公告）日： | 2014-07-16 |
| 发明（设计）人： | 松井知子 | 申请（专利权）人： | 诺维信公司 |
| 主分类号： | C12N9/52 | 分类号： | C12N9/52;C12N15/62;C12N15/81 |
| 代理公司： | 北京尚诚知识产权代理有限公司 11322 | 代理人： | 龙淳;顾小曼 |
| 地址： | 丹麦*** | 国省代码： | 丹麦;DK |
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| 摘要： | 本发明涉及在酵母中生产蛋白酶的方法，其包括：提供包括至少一个多核苷酸表达构建体的酵母宿主细胞，该多核苷酸表达构建体编码与第二多肽翻译融合的由该宿主细胞分泌的第一多肽，其中该第二多肽是具有与SEQ ID NO:2类似的成熟氨基酸序列的蛋白酶；相应的酵母宿主细胞和表达构建体。 | ||
| 搜索关键词： | 酵母 生产 细菌 蛋白酶 方法 | ||
【主权项】：
一种在酵母中生产蛋白酶的方法，包括：(a)提供包括至少一个多核苷酸表达构建体的酵母宿主细胞，所述多核苷酸表达构建体编码与第二多肽翻译融合的由所述宿主细胞分泌的第一多肽，其中所述第二多肽选自：(i)其成熟部分与SEQ ID NO:2的成熟多肽；优选与SEQ ID NO:2的位置[1‑412]具有至少60％，例如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％氨基酸序列同一性的蛋白酶；(ii)其成熟部分由与SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列；优选与SEQ ID NO:1的位置[397‑1632]具有至少60％，例如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％DNA序列同一性的多核苷酸所编码的蛋白酶；(iii)其成熟部分由在低等严格条件、中等严格条件、中高等严格条件、高等严格条件或极高等严格条件下与SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列；优选与SEQ ID NO:1的位置[397‑1632]；或两者中任一者的全长互补物杂交的多核苷酸所编码的蛋白酶；(iv)SEQ ID NO:2的成熟多肽、优选SEQ ID NO:2的位置[1‑412]的变体，其包括在一个或多个位置上的取代、缺失和/或插入；和(v)(i)、(ii)、(iii)或(iv)多肽的具有蛋白酶活性的片段，(b)在有益于所述第一多肽的表达和分泌的条件下培养所述宿主细胞，由此分泌翻译融合多肽并生产成熟蛋白酶；和(c)任选地，回收蛋白酶。
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