[发明专利]大豆种子总蛋白质的提取方法及其专用试剂

摘要

本发明公开了大豆种子总蛋白质的提取方法及其专用试剂。所述方法包括如下步骤：1）取大豆种子和溶液S1按1g:3ml的比例混合提取蛋白质，收集所有物质获得混合物甲；2）向步骤1）的所述混合物甲中加入与步骤1）所述溶液S1体积相同的溶液S2再提取蛋白质，收集所有物质获得混合物乙；3）将步骤2）所述混合物乙离心，取上清液用三氯乙酸沉淀，获得所述大豆种子总蛋白质。所述溶液S1和S2为专用试剂。使用本发明方法及试剂提取大豆种子蛋白质量较好，纯度较高，在进行双向电泳分析时可得到900个蛋白点，一些低分子量、低丰度蛋白清晰可见。通过质谱可鉴定363个蛋白点，远远高于现已报道的其他方法。本发明对植物蛋白质组学的研究具有重大的应用价值。

主权项

一种提取大豆种子总蛋白质的方法，包括如下步骤：1）取大豆种子和溶液S1按1g:3ml的比例混合提取蛋白质，收集所有物质获得混合物甲；2）向步骤1）的所述混合物甲中加入与步骤1）所述溶液S1体积相同的溶液S2再提取蛋白质，收集所有物质获得混合物乙；3）将步骤2）所述混合物乙离心，取上清液用三氯乙酸沉淀，获得所述大豆种子总蛋白质；所述溶液S1的溶剂为水，溶质为蔗糖、Tris‑HCl、乙二醇二乙醚二胺四乙酸、苯甲基磺酰氟和β‑巯基乙醇，所述蔗糖、Tris‑HCl、乙二醇二乙醚二胺四乙酸、苯甲基磺酰氟和β‑巯基乙醇在所述溶液S1中的浓度分别为170g/L、40mmol/L、20mmol/L、2mmol/L和5%体积百分含量；所述溶液S1的pH值为7.5；所述溶液S2的溶剂为水，溶质为蔗糖、Tris‑HCl、乙二醇二乙醚二胺四乙酸、苯甲基磺酰氟和聚乙二醇辛基苯基醚，所述蔗糖、Tris‑HCl、乙二醇二乙醚二胺四乙酸、苯甲基磺酰氟和聚乙二醇辛基苯基醚在所述溶液S2中的浓度分别为170g/L、40mmol/L、20mmol/L、2mmol/L和4%体积百分含量；所述溶液S2的pH值为7.5。