[发明专利]具有血管化能力的组织工程骨及其制备方法无效
申请号: | 201210488049.7 | 申请日: | 2012-11-27 |
公开(公告)号: | CN103007360A | 公开(公告)日: | 2013-04-03 |
发明(设计)人: | 段春光;刘建;孟国林 | 申请(专利权)人: | 段春光 |
主分类号: | A61L27/54 | 分类号: | A61L27/54;A61L27/24 |
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地址: | 710032 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明公开了一种具有血管化能力的组织工程骨的制备方法,包括以下步骤:A1,VEGF、Ang-1基因质粒的获取及扩增、纯化;A2,VEGF、Ang-1基因质粒与I型胶原混合溶液的制备;A3,将上述获得的支架材料在真空环境下置于所述的I型胶原混合溶液中抽吸4h,使原始支架孔洞中充分浸入I型胶原溶液;混合物于-80℃冷冻12h后,在真空冻干机中冻干48-72h以使孔洞中形成胶原海绵结构;37℃下用1%戊二醛溶液对胶原海绵结构进行交联10min;用去离子水反复洗涤后置于冻干机中冻干,构建成具有双基因修饰的新型人工骨。将构建的组织工程人工骨用于动物体内节段性骨缺损的修复,具有良好的修复效果。 | ||
搜索关键词: | 具有 血管 能力 组织 工程 及其 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种具有血管化能力的组织工程骨的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:A1,VEGF、Ang‑1基因质粒的获取及扩增、纯化;A2,VEGF、Ang‑1基因质粒与I型胶原混合溶液的制备;具体方法为:I型胶原蛋白粉末置于0.2mol/L醋酸溶液中,PH=3.2,配成0.3wt%的I型胶原溶液,4℃中充分搅拌12h,以使其充分溶解;然后将得到的VEGF、Ang‑1的质粒与I型胶原溶液混合,质粒浓度按照各20ug/ml配制;A3,将上述获得的支架材料在真空环境下置于所述的I型胶原混合溶液中抽吸4h,使原始支架孔洞中充分浸入I型胶原溶液;混合物于‑80℃冷冻12h后,在真空冻干机中冻干48‑72h以使孔洞中形成胶原海绵结构;37℃下用1%戊二醛溶液对胶原海绵结构进行交联10min;用去离子水反复洗涤后置于冻干机中冻干,构建成具有双基因修饰的新型人工骨。
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