[发明专利]一种金耳发酵美白液的制备方法

摘要

本发明属生物工程技术应用领域，具体涉及一种金耳发酵美白液的制备方法。该金耳发酵液为淡黄色澄清液体，是金耳深层发酵后的液体经过浓缩，脱蛋白，透析得到的。该发酵液所含氨基酸中甘氨酸占38％以上，缬氨酸占9％以上，苯丙氨酸占7％以上，酪氨酸占7％以上，亮氨酸占6％以上。除了发酵液组分外，包括其他组分：VC磷酸脂，透明质酸。具有美白活性，可应用于制备具有美白作用的化妆品。

主权项

一种金耳发酵美白液的制备方法，其特征在于：外观为淡黄色液体，是金耳通过深层发酵获得的发酵液经过浓缩，脱蛋白，透析后再加入VC磷酸酯，透明质酸和蒸馏水，滤过除菌后制得；其中发酵液所含氨基酸中甘氨酸占38％以上，缬氨酸占9％以上，苯丙氨酸占7％以上，酪氨酸占7％以上，亮氨酸占6％以上；所述的美白液的制备方法，步骤如下：(1)菌种培养出发菌种为实验室斜面保藏菌种；①摇瓶种子培养(1)摇瓶种子培养摇瓶种子培养基：PDA1L加磷酸二氢钾1g，硫酸镁0.5g，牛肉膏2g，蛋白胨1g，pH6.0；培养方法：从活化的斜面菌种中取3～4块黄豆大小相同的菌块，接种于摇瓶种子培养基中，250mL三角瓶装培养基100mL于25℃，120r/min，振荡培养7d；(2)摇瓶发酵培养发酵培养基：葡萄糖4g/100mL、酵母粉1g/100mL、磷酸二氢钾0.2g/100mL、硫酸镁0.05g/100mL；培养方法：将培养好的种子以15％的接种量接入摇瓶发酵培养基中25℃，120r/min，振荡培养7d；(3)发酵液浓缩，脱蛋白，透析培养后离心，取上清液旋转蒸发仪浓缩后用Sevage法去除游离蛋白，即按发酵液1/5的体积加入氯仿，然后加入氯仿体积1/5的正丁醇，混合后振荡过夜后4000rpm离心20min，收集上清液，反复操作5次至氯仿‑正丁醇层不浑浊为止。然后取上清液中装入透析袋中，扎紧袋口，悬浮于蒸馏水中，透析72h，中间每隔12小时换水一次，得发酵液；(2)发酵液浓缩，脱蛋白，透析培养后离心，取上清液旋转蒸发仪浓缩后用Sevage法去除游离蛋白，然后取上清液透析；(3)其他组分的添加及滤过除菌①其他组分的添加发酵液浓缩后加入VC磷酸酯、透明质酸和蒸馏水；取浓缩后的发酵液60g‑80g，加入VC磷酸酯5g‑8g；透明质酸0.1g‑0.5g；蒸馏水补足100mL；②滤过除菌上述液体通过0.22μm的滤膜除菌。