[发明专利]马铃薯Y病毒阳性对照品的制备方法无效
申请号: | 201210371597.1 | 申请日: | 2012-09-29 |
公开(公告)号: | CN102854313A | 公开(公告)日: | 2013-01-02 |
发明(设计)人: | 张威;白艳菊;高艳玲;范国权;申宇;李学湛;孟宪欣;卢娜 | 申请(专利权)人: | 黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569;G01N33/543;G01N33/531 |
代理公司: | 哈尔滨市松花江专利商标事务所 23109 | 代理人: | 王艳萍 |
地址: | 150086 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | 马铃薯Y病毒阳性对照品的制备方法,它涉及病毒阳性对照品的制备方法。它为了解决现有PVY病毒检测试剂盒中的阳性对照价格昂贵、保质期短以及不利于推广普及的问题。方法:一、将PVY繁殖寄主叶片和提取缓冲液混合后进行研磨,过滤得病毒汁液;二、明胶和提取缓冲液混合加热至融化,加入蔗糖,融化后倒入病毒汁液中混匀,再倒入青霉素瓶中,然后冻干,得马铃薯Y病毒的冻干粉即完成。本发明制备的马铃薯Y病毒阳性对照品价格低,是进口价格的1/3;保质期达3年以上,DAS-ELISA检测结果值达2.000以上;配合黑龙江省农业科学院生产的PVY病毒检测试剂盒使用,利于推广普及。 | ||
搜索关键词: | 马铃薯 病毒 阳性 对照 制备 方法 | ||
【主权项】:
马铃薯Y病毒阳性对照品的制备方法,其特征在于马铃薯Y病毒阳性对照品的制备方法按以下步骤实现:一、将10g的PVY繁殖寄主叶片和120mL的提取缓冲液混合后进行研磨,然后用双层纱布过滤,得到病毒汁液;二、将0.06~0.12g的明胶和80mL的提取缓冲液混合,加热至融化,然后加入6~10g的蔗糖,继续加热至蔗糖融化,倒入病毒汁液中混匀,再倒入青霉素瓶中,每瓶加入1~2ml,盖上瓶塞并放入冷冻干燥机中抽干,得到马铃薯Y病毒的冻干粉,即完成马铃薯Y病毒阳性对照品的制备;其中步骤一中提取缓冲液每100mL由20g的PVP‑40000、8.0g的NaCL、0.2g的KH2PO4、2.9g的Na2HPO4·12H2O、0.2g的KCL、0.2g的NaN3、0.5mL的Tween20和余量的蒸馏水组成。
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