[发明专利]四种致腹泻性大肠杆菌的多重PCR检测方法及其引物组

摘要

本发明涉及一种基于多重PCR技术快速检测四种致腹泻性大肠杆菌的方法及其专用引物。分别选择肠出血性大肠杆菌O157:H7O-antigen基因、肠毒素性大肠杆菌LT基因、肠致病性大肠杆菌bfpA基因和肠侵袭性大肠杆菌invasionplasmid基因为靶基因，通过基因序列的比对分析，选取靶基因序列的保守区设计合成引物，具体引物如序列表SEQ ID No.1-8所示，建立多重PCR检测方法，对4种致腹泻性大肠杆菌进行定性检测。本发明方法具有较强的检测特异性。本发明还涉及到检测用试剂盒，还具有快速简单，准确性高，灵敏度好的优点。

主权项

一种四种致腹泻性大肠杆菌的多重PCR检测用引物组，其特征在于，核苷酸序列为：肠出血性大肠杆菌O157:H7引物对为：OF：5′‑ATTGCGCTGAGGCCTTTG‑3′，OR：5′‑CGAGTACATTGGCATCGTG‑3′；肠毒素性大肠杆菌引物对为：LF：5′‑GCACACGCAGCTCCTCAGTC‑3′，LR：5′‑TCCTTCATCCTTTCAATGGCTTT‑3′；  肠致病性大肠杆菌引物对为：BF：5′‑GGAAGTCAAATTCATGGGGGTAT‑3′， BR：5′‑GGAATCAGACGCAGACTGGTAGT‑3′；  肠侵袭性大肠杆菌引物对为：IF：5′‑CTGGATGGTATGGTGAGG‑3′， IR：5′‑GGAGGCCAACAATTATTTCC‑3。