[发明专利]四种致腹泻性大肠杆菌的多重PCR检测方法及其引物组

权利要求书

1.一种四种致腹泻性大肠杆菌的多重PCR检测用引物组，其特征在于，核苷酸序列为：

肠出血性大肠杆菌O₁₅₇:H₇引物对为：

OF：5′-ATTGCGCTGAGGCCTTTG-3′，

OR：5′-CGAGTACATTGGCATCGTG-3′；

肠毒素性大肠杆菌引物对为：

LF：5′-GCACACGCAGCTCCTCAGTC-3′，

LR：5′-TCCTTCATCCTTTCAATGGCTTT-3′；  

肠致病性大肠杆菌引物对为：

BF：5′-GGAAGTCAAATTCATGGGGGTAT-3′， 

BR：5′-GGAATCAGACGCAGACTGGTAGT-3′；  

肠侵袭性大肠杆菌引物对为：

IF：5′-CTGGATGGTATGGTGAGG-3′， 

IR：5′-GGAGGCCAACAATTATTTCC-3。

2.根据权利要求1所述的一种四种致腹泻性大肠杆菌的多重PCR检测用引物组，其特征在于：所述的引物对的添加摩尔比为OF/OR: LF/LR: BF/BR: IF/IR为1:1:1:1.3。

3.一种四种致腹泻性大肠杆菌的多重PCR检测用阳性对照品的制备PCR扩增引物组，其特征在于，核苷酸序列为：

肠出血性大肠杆菌O₁₅₇:H₇阳性对照品的制备PCR扩增引物：

EHEC-F：5′-CTATAGAAATTGCTGCTGTAG-3′，

EHEC-R：5′-TCTAACCCTTCAGCATTATTA-3′；

肠毒素性大肠杆菌阳性对照品的制备PCR扩增引物：

ETEC-F：5′-AACCCTGGATTCATCATGCAC-3′，

ETEC-R：5′-TAGTTTTCCATGCTGATTGCC-3′；

肠致病性大肠杆菌阳性对照品的制备PCR扩增引物：

EPEC-F：5′-AAATCATGAATAAGAAATACG-3′，

EPEC-R：5′-CAGTATTTTTACATGCAGTTG-3′；

肠侵袭性大肠杆菌阳性对照品的制备PCR扩增引物：

EIEC-F：5′-CTGGAAAAACTCAGTGCCTCT-3′，

EIEC-R：5′-AGCTTCCGTACGCTTCAGTAC-3′。