[发明专利]荧光假单胞菌催化胞苷类化合物羟基保护反应的方法有效

专利信息
申请号: 201210318062.8 申请日: 2012-08-31
公开(公告)号: CN102851336A 公开(公告)日: 2013-01-02
发明(设计)人: 李晓凤;冯广莉;吴晖;赵光磊;余以刚 申请(专利权)人: 华南理工大学
主分类号: C12P19/38 分类号: C12P19/38;C12R1/39
代理公司: 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 代理人: 何淑珍
地址: 510640 广*** 国省代码: 广东;44
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要: 发明公开了荧光假单胞菌催化胞苷类化合物羟基保护反应的方法,该方法是按细胞催化剂用量为40-80mg/mL、胞苷类化合物与酯化试剂摩尔比为1:20~1:50将细胞催化剂、胞苷类化合物与酯化试剂加入有机溶剂中,在温度为20~50℃、初始水含量1%~5%、振荡速度为50~300rpm、常压下反应24~72小时得到5′-羟基被酯化保护的胞苷类化合物。本发明可以“一步法”完成该基团保护反应,具有成本低、反应条件温和、环境友好、反应过程简单可控的优点。
搜索关键词: 荧光 假单胞菌 催化 胞苷类 化合物 羟基 保护 反应 方法
【主权项】:
荧光假单胞菌催化胞苷类化合物羟基保护反应的方法,其特征在于:将胞苷类化合物与酯化试剂、荧光假单胞菌加入到含有吡啶的有机溶剂中,胞苷类化合物与酯化试剂摩尔比为1:20~1:50,荧光假单胞菌用量为40~80 mg/mL所述有机溶剂,控制反应体系温度为20~50℃、震荡速度为50~300 rpm,反应24~72小时后,胞苷类化合物的5′‑羟基被酯化。
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于华南理工大学,未经华南理工大学许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/201210318062.8/,转载请声明来源钻瓜专利网。

同类专利
  • 一种提高β-胸苷产量的发酵工艺-201910836082.6
  • 张国银;何永进 - 赤峰蒙广生物科技有限公司
  • 2019-08-29 - 2019-11-05 - C12P19/38
  • 本发明公开了一种提高β‑胸苷产量的发酵工艺,它是将β‑胸苷的生产菌种接种到生产培养基上,经过发酵培养,制得含有β‑胸苷的发酵液,所述的生产培养基包含如下组分:葡萄糖2‑10g/L,六偏磷酸钠0‑4g/L,磷酸二氢钾1‑5g/L,磷酸氢二铵1‑5g/L,氯化钙0.2‑0.8g/L,柠檬酸0.3‑0.8g/L,甘氨酸2.5‑5g/L,酵母粉10‑30g/L,脱脂豆粉10‑30g/L,植物源蛋白粉0.5‑3g/L,氯化钙0‑5g/L,维生素B10.01g/L,烟酸0.01g/L,三氯化铁0.03g/L,七水合硫酸亚铁0.02g/L,消泡剂0.15ml/L。该工艺培养基配方合理,可实现高密度发酵培养,成本低,产量高。
  • 一种β-胸苷的合成方法-201710273108.1
  • 陈车翘 - 苏州笃美生物科技有限公司
  • 2017-04-25 - 2019-09-24 - C12P19/38
  • 本发明公开了一种β‑胸苷的合成方法,采用酶工程逆向合成胸苷,使用葡萄糖脱氢酶、尿苷激酶、乌贼酸激酶、核糖核苷二磷酸还原酶、胸苷酸激酶以及胸苷激酶,以5‑甲基尿苷为原料,经过两个磷酸化步骤产生核苷酸,然后转化为脱氧核苷酸,再经两步脱磷酸化产生胸苷。本发明公开了一种β‑胸苷的合成方法,成本大大降低,缩短生产周期,减少工业废物,无毒环保。
  • 一种新型尿嘧啶的制备方法-201811178090.8
  • 吴鹏程;李浩源;谢卫锋;孔献;陈彤 - 无锡富泽药业有限公司
  • 2018-10-10 - 2019-01-04 - C12P19/38
  • 本发明提供了一种新型尿嘧啶的制备方法,包括如下步骤:步骤一:将2‑羟基嘧啶、甲酸钠、FeCl2加入水中,加热搅拌,调节PH至7.5‑8.5;步骤二:加入氧化型辅酶I、甲酸脱氢酶,进行反应,期间调节PH至7.9‑8.1;步骤三:反应结束后,调节反应液至中性,降温,过滤得粗产品,粗产品经水洗除酶及盐,干燥制得尿嘧啶。本发明提供的新型尿嘧啶的制备方法,利用氧化型辅酶I、甲酸脱氢酶催化合成尿嘧啶,整个工艺绿色环保,成本低于现有工艺,且具有高产率和高纯度。
  • 一种联产尿苷和乙偶姻的发酵生产方法-201610137185.X
  • 谢希贤;陈宁;张红超;李国梁;吴鹤云;范晓光;徐庆阳 - 天津科技大学
  • 2016-03-10 - 2019-01-04 - C12P19/38
  • 本发明属于发酵工程技术领域,具体涉及一种联产尿苷及乙偶姻的发酵生产方法。现有的技术大多利用枯草芽孢杆菌单独生产尿苷或者乙偶姻,并且产量水平都不高,存在原料利用率低,成本高的问题,本发明提供了一株通过诱变选育出来的具有工业化应用潜力的枯草芽孢杆菌及其相应的发酵工艺,可以联产尿苷及乙偶姻,产量分别达到尿苷25‑32g/L,乙偶姻50‑65g/L。大大提高原料的利用率,降低成本,从而缓解资源和环境压力。
  • 从虫草蛹中萃取核苷类和氨基酸类活性物质的方法-201810266697.5
  • 李祥麟;伏迪;兰茹;汪永生;张驰 - 全家一百(苏州)生物科技有限公司
  • 2018-03-28 - 2018-08-28 - C12P19/38
  • 本发明公开了一种从虫草蛹中萃取核苷类和氨基酸类活性物质的方法,包括:将摘除子实体的虫草蛹以丙三醇消毒吹干,将虫草蛹置于黑暗条件下处理36~48h,其中采用由虫草菌丝形成的悬浮液喷洗培养室调节并保持湿度;将黑暗处理后的虫草蛹于‑20~‑10℃、惰性气氛内保存处理3~6h;将所述虫草蛹直接粉碎过60~100目筛,之后于室温下加入石油醚脱脂,滤去石油醚得到蛹虫粉末;之后依次提取获得核苷类活性物质和氨基酸类活性物质。本发明提供的方法可以实现蛹体中核苷类、氨基酸类活性物质的高效提取,而且这些核苷类活性物质利于促进生物组织的修复和抑制细菌感染,这些氨基酸类活性物质呈现出很好的抗肿瘤特性,有望在医疗领域广泛应用。
  • 一种脂肪酶催化在线合成5’-O-月桂酰-5-甲基尿苷的方法-201610327780.X
  • 杜理华;蒋志鹏;成柄灼;罗锡平 - 浙江工业大学
  • 2016-05-17 - 2017-11-24 - C12P19/38
  • 本发明公开了一种脂肪酶催化在线合成5'‑O‑月桂酰‑5‑甲基尿苷的方法。所述方法包括以体积比为18~16的二甲亚砜和叔戊醇为反应溶剂,以摩尔比为15~13的5‑甲基尿苷与月桂酸乙烯酯为原料,以0.5~1.0g脂肪酶Lipozyme TLIM为催化剂,将原料和反应溶剂置于注射器中,将脂肪酶Lipozyme TLIM均匀填充在微流控通道反应器的反应通道中,在注射泵的推动下使原料和反应溶剂连续通入反应通道中进行酰化反应,所述微流控通道反应器的反应通道内径为0.8~2.4mm,反应通道长为0.5~1.0m;控制酯化反应温度为15~50℃,酯化反应时间为20~35min,通过产物收集器在线收集反应液,反应液经常规后处理得到5'‑O‑月桂酰‑5‑甲基尿苷。本发明具有反应时间短、选择性高及产率高的优点。
  • 一种脂肪酶催化在线合成5’-O-乙酰-5-甲基尿苷的方法-201610327830.4
  • 杜理华;沈乐;成柄灼 - 浙江工业大学
  • 2016-05-17 - 2017-11-24 - C12P19/38
  • 本发明公开了一种脂肪酶催化在线合成5'‑O‑乙酰‑5‑甲基尿苷的方法。所述方法包括以体积比为18~16的二甲亚砜和叔戊醇为反应溶剂,以摩尔比为15~13的5‑甲基尿苷与乙酸乙烯酯为原料,以0.5~1.0g脂肪酶Lipozyme TLIM为催化剂,将原料和反应溶剂置于注射器中,将脂肪酶Lipozyme TLIM均匀填充在微流控通道反应器的反应通道中,在注射泵的推动下使原料和反应溶剂连续通入反应通道中进行酰化反应,所述微流控通道反应器的反应通道内径为0.8~2.4mm,反应通道长为0.5~1.0m;控制酯化反应温度为15~50℃,酯化反应时间为20~35min,通过产物收集器在线收集反应液,反应液经常规后处理得到5'‑O‑乙酰‑5‑甲基尿苷。本发明具有反应时间短、选择性高及产率高的优点。
  • 一种脂肪酶催化在线合成5’-O-乙酰-5-氟尿苷的方法-201610328944.0
  • 杜理华;成柄灼;罗锡平 - 浙江工业大学
  • 2016-05-17 - 2017-11-24 - C12P19/38
  • 本发明公开了一种脂肪酶催化在线合成5'‑O‑乙酰‑5‑氟尿苷的方法。所述方法包括以体积比为18~16的二甲亚砜和叔戊醇为反应溶剂,以摩尔比为15~13的5‑氟尿苷与乙酸乙烯酯为原料,以0.5~1.0g脂肪酶Lipozyme TLIM为催化剂,将原料和反应溶剂置于注射器中,将脂肪酶Lipozyme TLIM均匀填充在微流控通道反应器的反应通道中,在注射泵的推动下使原料和反应溶剂连续通入反应通道器中进行酰化反应,所述微流控通道反应器的反应通道内径为0.8~2.4mm,反应通道长为0.5~1.0m;控制酯化反应温度为15~50℃,酯化反应时间为20~35min,通过产物收集器在线收集反应液,反应液经常规后处理得到5'‑O‑乙酰‑5‑氟尿苷。本发明具有反应时间短、选择性高及产率高的优点。
  • 一种利巴韦林的制备方法-201610060219.X
  • 谢希贤;曹化杰;王法松;陈宁;范晓光;李燕军;徐庆阳 - 天津科技大学
  • 2016-01-28 - 2016-04-13 - C12P19/38
  • 本发明涉及一种利巴韦林的制备方法,以过表达嘌呤核苷磷酸化酶(PNPase)的基因工程菌BL21/pET-His-pupG为生产菌株,采用乳糖诱导培养收集细胞,并利用明胶包埋法对细胞进行固定化处理。在pH7.6的磷酸盐缓冲液中,使用固定化细胞催化底物鸟苷和1,2,4-三氮唑-3-甲酰胺(TCA)连续多批次生产利巴韦林,批次最高转化率可达到83%以上。最后提取转化液中的利巴韦林,产品纯度可达到99%以上,提取过程总收率达75%以上。
  • 用于发酵制备喷司他丁的发酵培养基及发酵制备方法-201410127154.7
  • 姜文侠;李晓辉;张笑然;刘涛 - 中国科学院天津工业生物技术研究所
  • 2014-03-31 - 2015-09-30 - C12P19/38
  • 本发明公开了一种用于发酵制备喷司他丁的发酵培养基及发酵制备方法,属于发酵工程和天然产物的生物合成领域,发酵制备喷司他丁的方法步骤包括:(1)将链霉菌Streptomyces sp.ATCC39365接种到摇瓶种子培养基中,在200~350r/min,28~34℃摇床中,培养36~72h,得到种子液;(2)将种子液按体积接种量为3%~20%的比例接种到发酵培养基中,在150~300r/min,28~34℃摇床中,培养200~400h,收集发酵液;用本发明的发酵培养基和本发明的方法,可以使发酵制备喷司他丁其喷司他丁产量较高,发酵能力稳定,适于进行大规模工业化生产。
  • 一种2’-脱氧-5-氟尿苷的微生物合成方法-201410504731.X
  • 易喻;应国清;江林林;王鸿;梅建凤;陈建澍 - 浙江工业大学
  • 2014-09-27 - 2015-01-21 - C12P19/38
  • 本发明公开了一种2’-脱氧-5-氟尿苷的微生物合成方法,所述的方法为:以2’-脱氧核糖-1-磷酸二环己胺盐和5-氟尿嘧啶为底物,以产嘧啶核苷磷酸化酶的菌株经发酵培养获得的湿菌体为催化剂,以pH值为6.5~8.5的磷酸缓冲液为反应介质,在45~65℃条件下进行转化反应,反应结束后,获得2’-脱氧-5-氟尿苷;本发明方法2’-脱氧-5-氟尿苷的转化率达到了79.36%,一步酶促合成,条件温和,反应时间短,并且避免了底物脱氧核糖供体来源不足、价格昂贵的问题;应用全细胞进行催化,无需进行酶的分离纯化,反应结束后菌体回收方便,有利于工业规模化生产。
  • 生物转化法生产核苷类药物中间体阿糖胞苷的方法-201310044260.4
  • 朱嘉震;史峻嵩;李海存;王颖;赵新远;尹传祥;王金才 - 山东斯递尔化工科技有限公司
  • 2013-02-05 - 2014-08-06 - C12P19/38
  • 本发明公开了一种生物转化法生产阿糖胞苷的方法。该方法是将瑞士乳杆菌种子液接入发酵培养基中发酵培养,得到粗菌体,将缓冲溶液加入粗菌体,制成细胞悬浮液,向所述细胞悬浮液中加入阿糖尿苷和胞嘧啶进行酶促反应,获得阿糖胞苷。所述发酵培养基由下列重量份的物质组成:酵母浸粉10-50份,葡萄糖1-10份,蛋白胨1-15份,硫酸氨1-7份,磷酸氢二钾2-12份,玉米浆2-17份,氯化钙0.5-6份,水1000份。本发明是生物转化法生产阿糖胞苷,充分利用酶的高效性、专一性和温和性,与传统化学合成方法相比,具有选择性高、条件温和、工艺简单、成本低和污染小等特点。
  • 一种酶法复合化学法制备卡培他滨中间体2 ,3 -二-O-乙酰基-5-脱氧-5-氟胞苷的方法-201210216611.0
  • 田永强;叶祥 - 张金荣;曾裕建
  • 2012-06-28 - 2014-01-15 - C12P19/38
  • 本发明提供了一种适合实际的工业化大生产和具有较高的收率、质量和良好的稳定性的卡培他滨中间体2’,3’-二-O-乙酰基-5’-脱氧-5-氟胞苷的制备方法。该卡培他滨中间体的制备方法包括:创新性地使用酶催化剂嘧啶核苷磷酸化酶(EC2.4.2.2)将底物5-氟-胞嘧啶(5-fluorocytosine)与5-脱氧核糖-1-磷酸(5-deoxyribose-1-phosphate)转化成5’-脱氧-5-氟-胞苷,5’-脱氧-5-氟-胞苷再经乙酰化反应得到2’,3’-二-O-乙酰基-5’-脱氧-5-氟胞苷,该方法收率高,质量好,符合环保要求,工艺简单易于操作。
  • 一种酶催化核苷类药物区域选择性岩藻糖基化修饰的方法-201210470287.5
  • 李宁;宗敏华;颜丽强 - 华南理工大学
  • 2012-11-19 - 2013-03-13 - C12P19/38
  • 本发明公开了一种酶催化核苷类药物区域选择性岩藻糖基化修饰的方法,具体步骤如下:(1)将缓冲液、核苷和对硝基苯基β-岩藻糖苷混合均匀;(2)按酶用量为1~30U/克核苷的比例加入β-半乳糖苷酶,在30~55℃、200r/min下,反应5~100h后,在100℃下处理10min,淬灭酶反应;(3)利用柱层析分离得到修饰后的产物。本发明具有反应过程简单、区域选择性高、无需繁琐的保护与脱保护步骤、反应条件温和、环境友好及产物易分离等优点。
  • 利用米曲霉细胞催化胞苷类化合物羟基保护反应的方法-201210318063.2
  • 李晓凤;刘洪伟;许喜林;吴晖;赵光磊;卢志洪 - 华南理工大学
  • 2012-08-31 - 2013-01-02 - C12P19/38
  • 本发明公开了一种利用米曲霉细胞催化胞苷类化合物羟基保护反应的方法,该方法是按细胞催化剂用量为30-100mg/mL、胞苷类化合物与酯化试剂摩尔比为1:30~1:90将细胞催化剂、胞苷类化合物与酯化试剂加入有机溶剂中,在温度为20~50℃、初始水含量1%~4%、振荡速度为100~300rpm、常压下反应24~72小时得到羟基被酯化保护的胞苷类化合物。本发明可以“一步法”完成该基团保护反应,具有成本低、反应条件温和、环境友好、反应过程简单可控的优点。
  • 荧光假单胞菌催化胞苷类化合物羟基保护反应的方法-201210318062.8
  • 李晓凤;冯广莉;吴晖;赵光磊;余以刚 - 华南理工大学
  • 2012-08-31 - 2013-01-02 - C12P19/38
  • 本发明公开了荧光假单胞菌催化胞苷类化合物羟基保护反应的方法,该方法是按细胞催化剂用量为40-80mg/mL、胞苷类化合物与酯化试剂摩尔比为1:20~1:50将细胞催化剂、胞苷类化合物与酯化试剂加入有机溶剂中,在温度为20~50℃、初始水含量1%~5%、振荡速度为50~300rpm、常压下反应24~72小时得到5′-羟基被酯化保护的胞苷类化合物。本发明可以“一步法”完成该基团保护反应,具有成本低、反应条件温和、环境友好、反应过程简单可控的优点。
  • 一种化学-生物酶法组合制备2′-脱氧尿苷的方法-201210083493.0
  • 应国清;钱捷;彭美红;王鸿;蒲通;易喻;梅建凤;陈建澍 - 浙江工业大学
  • 2012-03-27 - 2012-12-19 - C12P19/38
  • 本发明提供了一种化学-生物酶法组合制备2′-脱氧尿苷的方法,该方法采用“结晶诱导不对称转化”技术合成得到了单一α构型的核苷类药物中间体2-脱氧-α-D-核糖-1-磷酸,再利用这个中间体为底物,加入尿嘧啶,在尿苷磷酸化酶的作用下生物转化合成得到2′-脱氧尿苷。本发明化学-生物组合技术的应用,结合了化学法与生物法的优点,避免了各自的缺陷,收率高,适用于工业化生产,其中采用“结晶诱导不对称转化技术”可以得到供应充足,构型单一的2-脱氧-α-D-核糖-1-磷酸中间体,无需再进行分离纯化;生物转化过程采用高效、专一的尿苷磷酸化酶催化一步完成,其专一性强,转化率高,条件温和,环境友好。
  • 抗生链霉菌发酵生产喷司他丁的发酵培养基以及发酵方法-201010164625.3
  • 陈少欣;王岩;杨鹏 - 上海医药工业研究院
  • 2010-04-29 - 2011-11-09 - C12P19/38
  • 本发明提供了一种有利于抗生链霉菌高效发酵生产喷司他丁的发酵培养基以及相应的发酵方法。该发酵培养基包括碳源和氮源,其中按培养基的总重量计,所述的碳源的含量是0.5~14%,所述的氮源的含量是0.5~10%,所述的碳源选自葡萄糖、糊精和小麦淀粉中的一种或多种,所述的氮源选自细豆粕粉、大豆蛋白、黄豆饼粉、酵母浸粉和棉子饼粉中的一种或多种。本发明通过优选发酵培养基的碳氮源成分及配比,优化培养温度、pH等发酵参数,从而大大提高喷司他丁的产量。提供的喷司他丁的发酵生产方法,大幅提高了喷司他丁的发酵单位,适用于喷司他丁的规模化生产。
  • 5′-酰化尿苷的制备方法及在制备治疗心脏病、肝病药物中的应用-200910220260.9
  • 陈玉松;李恕;刘庆莹;石维 - 珍奥集团股份有限公司
  • 2009-11-30 - 2010-09-15 - C12P19/38
  • 本发明公开一种5′-酰化尿苷的制备方法及在制备治疗心脏病、肝病药物中的应用,具体制备方法是将核糖核酸(RNA)粉溶解、酶解,并将酶解液进行超滤纯化并进行阴离子树脂柱交换分离、纳滤、离心得到5′-尿苷;将5′-尿苷悬浮于吡啶与N,N二甲基甲酰胺的混合溶液中并逐渐加入等当量的酸酐,蒸发溶剂;用90%甲醇溶解残留物,吸附至硅胶粒中,再蒸发掉多余溶剂;从再将剩余混合样液上的内有氯仿液的硅胶浆柱内,用氯仿-甲醇∶氯仿(20∶80)的洗脱液进行梯度线性洗脱,用薄板层析确定阶段洗脱液,收集所确定的阶段洗脱液,既得到所要的5′-酰化尿苷溶液,可重结晶或真空干燥,得到5′-酰化尿苷。
  • 5'-酰化胞苷的制备方法及在制备治疗心脏病、肝病药物中的应用-200910220259.6
  • 陈玉松;李恕;刘庆莹;石维 - 珍奥集团股份有限公司
  • 2009-11-30 - 2010-08-04 - C12P19/38
  • 本发明公开一种5’-酰化胞苷的制备方法及在制备治疗心脏病、肝病药物中的应用,具体制备方法是将核糖核酸粉溶解、酶解,并将酶解液进行超滤纯化并进行阴离子树脂柱交换分离、纳滤、离心得到5’-胞苷;将5’胞苷与20%盐酸反应,以制备成盐酸胞苷,将盐酸胞苷溶于N,N二甲基甲酰胺液中,然后加入等克分子当量的酸氯,于室温条件下搅拌混合液过夜,于真空条件下浓缩混合液呈油状物,与体积比为1∶1的二乙酰乙酯一起研磨生成二乙基酯;然后再与与二乙基酯等当量的碳酸氢钠研磨,收集固体结晶,用水洗涤,干燥重结晶,得到5’-酰化胞苷。
  • 混合溶剂中酶促5-氮杂胞苷酯衍生物合成的方法-200910036905.3
  • 宗敏华;李宁;陈西余 - 华南理工大学
  • 2009-01-22 - 2009-07-15 - C12P19/38
  • 本发明涉及混合溶剂中酶促5-氮杂胞苷酯衍生物合成的方法。在混合溶剂体系中加入5-氮杂胞苷和酰基供体,酰基供体与5-氮杂胞苷的摩尔比为1.1-30∶1,按5-氮杂胞苷与酶的质量比为0.1-10∶1加入酶,在温度为20-70℃、振荡速度为100-300rpm、常压下进行酰化反应,分离得到5-氮杂胞苷酯衍生物。本发明具有反应条件温和、环境友好、反应具有高度区域选择性、反应过程简单可控和产物易分离等优点。
专利分类
×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

400-8765-105周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top