[发明专利]一种人类粒细胞抗原(HNA)1-5系统基因分型的PCR-SBT方法及试剂有效

专利信息
申请号: 201210297522.3 申请日: 2012-08-21
公开(公告)号: CN102827932A 公开(公告)日: 2012-12-19
发明(设计)人: 朱发明;何俊俊;何吉;吕杭军 申请(专利权)人: 浙江省血液中心
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68
代理公司: 浙江杭州金通专利事务所有限公司 33100 代理人: 刘晓春
地址: 310006 *** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 发明提供一种HNA1-5系统抗原分型的PCR-SBT方法,它包括以下步骤:制备人基因组DNA;提供扩增引物,用聚合酶链反应分别扩增HNA-1、HNA-2、HNA-3、HNA-4和HNA-5抗原系统的基因序列;将扩增产物进行双酶切纯化;提供测序引物,将纯化产物进行测序PCR反应;将测序产物进行醋酸钠-乙醇沉淀法纯化,进行毛细管电泳测序;将获得的序列通过软件分析,确定其基因型。本发明还提供上述方法所用的试剂。本发明通过对HNA抗原5个系统分别进行序列测序,获得HNA抗原基因分型的寡核苷酸序列,精确地对其基因进行定型。本发明对于医学研究单位、药学研究和试剂开发单位具有重要的现实意义。
搜索关键词: 一种 人类 粒细胞 抗原 hna 系统 基因 pcr sbt 方法 试剂
【主权项】:
一种人类粒细胞抗原(HNA)1‑5系统基因分型的PCR‑SBT方法,其特征在于它对五个HNA抗原系统的基因进行分型,所述五个HNA抗原系统分别为HNA‑1、HNA‑2、HNA‑3、HNA‑4和HNA‑5,所述方法包括以下步骤:(1)制备人基因组DNA;(2)提供扩增引物,用聚合酶链反应分别扩增人基因组DNA中HNA‑1、HNA‑2、HNA‑3、HNA‑4和HNA‑5抗原系统的基因序列;(3)将步骤(2)得到的扩增产物进行双酶切纯化;(4)提供测序引物,将步骤(3)得到的纯化产物进行测序PCR反应;(5)将步骤(4)得到的测序产物进行醋酸钠‑乙醇沉淀法纯化,进行毛细管电泳测序;(6)将步骤(5)获得的序列通过软件分析,确定其基因型。
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