[发明专利]金属螯合法制备固定化果胶酶

摘要

一种以硅胶为载体的金属螯合型固定化果胶酶的制备方法。以活化硅胶为载体，硅烷偶联剂GLYMO为交联剂，IDA为螯合配基螯合金属离子Zn2+，然后固定果胶酶，形成固定化果胶酶，其结构为硅胶-GLYMO-IDA-Zn-Enzyme，所得固定化果胶酶为固态。此固定化果胶酶可构造酶反应器，反复分批反应或装柱连续反应，可用于果汁、果酒的澄清，麻类的脱皮，木材的防腐等。

主权项

1.一种固定化果胶酶的制备方法，其反应如下：其具体步骤为：①将水浮选好的硅胶加入到1∶1的盐酸中加热活化，产物水洗，于90℃下烘干，备用。②将用固体NaOH调节PH为11的螯合剂IDA溶液转移到圆底烧瓶中，利用冰浴使温度降到0℃，用移液管量取偶联剂硅烷偶联剂GLYMO，在电磁搅拌下慢慢的滴加入反应液中，加热搅拌反应，反应后得到淡黄色的澄清的透明的液体即为GLYMO-IDA，用浓盐酸调节PH到6，转移到密封的容器中，放入冰箱中保存。③将活化的硅胶加入用0.2mol/l的CH₃COONa调节PH5.5的溶液中并加热，再加入GLYMO-IDA产物，回流反应，得到产物即为硅胶-GLYMO-IDA，水洗，备用。④用ZnSO4溶液对硅胶-GLYMO-IDA加载Zn²⁺，得到产物硅胶-GLYMO-IDA-Zn²⁺，用大量的水洗，离心，备用。⑤将硅胶-GLYMO-IDA-Zn²⁺和果胶酶加入到磷酸盐调节PH为7.0的溶液中，反应后得到的产物即为硅胶-GLYMO-IDA-Zn-果胶酶，用磷酸缓冲液洗，水洗，NaCl洗，水洗，冷藏备用。