[发明专利]一种类志贺邻单胞菌的快速诊断方法有效
申请号: | 201210262462.1 | 申请日: | 2012-07-27 |
公开(公告)号: | CN102827928A | 公开(公告)日: | 2012-12-19 |
发明(设计)人: | 孟双;徐建国;叶长芸 | 申请(专利权)人: | 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04 |
代理公司: | 北京市颐合律师事务所 11383 | 代理人: | 李新军 |
地址: | 102208 北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提供了一种检测类志贺邻单胞菌的方法,所述方法利用环介导等温扩增技术,以hugA基因为目标基因,通过设计3对DNA引物,与待检测的DNA模板放入包括MgSO4和甜菜碱在内的扩增缓冲液中,在65℃恒温环境中扩增,再以80℃恒温环境终止反应,并对扩增产物进行检测。该方法设备简单,易操作、具有良好的特异性、灵敏度和重复性。 | ||
搜索关键词: | 种类 志贺邻单胞菌 快速 诊断 方法 | ||
【主权项】:
一种检测类志贺邻单胞菌的方法,所述方法包括如下步骤:(1)将待检测样本、序列如SEQ ID NO 1‑2所示的一对外引物、序列如SEQ ID NO 3‑4所示的一对内引物、序列如SEQ ID NO 5‑6所示的一对环引物、dNTP、Bst DNA聚合酶、MgSO4、甜菜碱以及环介导等温扩增缓冲液加入到反应容器中;(2)将步骤(1)所得的混合液放置于65℃恒温环境中进行DNA扩增反应;(3))将步骤(2)获得的产物放置于80℃恒温环境中,以终止步骤(2)所述的DNA扩增反应;(4)检测步骤(3)获得的产物。
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