[发明专利]一种北方根结线虫LAMP快速检测方法及应用有效
申请号: | 201210070924.X | 申请日: | 2012-03-16 |
公开(公告)号: | CN102586461A | 公开(公告)日: | 2012-07-18 |
发明(设计)人: | 彭德良;何旭峰;彭焕 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院植物保护研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 北京兆君联合知识产权代理事务所(普通合伙) 11333 | 代理人: | 胡敬红 |
地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及一种北方根结线虫LAMP快速检测方法及应用,属生物技术领域。本发明根据克隆测序的北方根结线虫ITS序列,在其序列保守区域设计了5条LAMP引物MHF3、MHB3、MHFIP、MHBIP和MHLB,探针MH-FITC-Probe5’端用FITC标记,其中MHFIP引物的5’端用生物素标记。通过对北方根结线虫DNA提取,采用上述特异性引物混合物、反应缓冲液和反应酶,等温扩增、扩增产物显色检测,从而快速检测出北方根结线虫。本发明的检测方法特异性强、灵敏度高、成本低廉、操作简便,灵敏度高,在北方根结线虫现场快速检测和北方根结线虫病的早期诊断方面具有很高的应用价值。 | ||
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【主权项】:
一种北方根结线虫LAMP快速检测方法,以北方根结线虫DNA为模板,LAMP反应体系试剂中包括引物混合物、反应缓冲液和反应酶,所述引物混合物有如下引物:①MHF3:5’‑GAATATGAGGTGACATGTTAGG‑3’,②MHB3:5’‑TCAATGTTTCTGCAGTTCG‑3’,③MHFIP:5’‑TGAAAAAAATATTGCTGGCGTCCACCTTAATCGGGTTTAAGACT‑3’,④MHBIP:5’‑TCTATCCTTATCGGTGGATCACTCCACAAATTATCGCAGTTAGCT‑3’,⑤MHLB:5’‑GGCTCGTGGATCCATGAAGAACG‑3’。
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