[发明专利]一种连续流动巢式PCR微流控方法无效
| 申请号： | 201210066670.4 | 申请日： | 2012-03-14 |
| 公开（公告）号： | CN102605065A | 公开（公告）日： | 2012-07-25 |
| 发明（设计）人： | 章春笋;邢达;舒博文 | 申请（专利权）人： | 华南师范大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人： | 谭英强 |
| 地址： | 510006 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种连续流动巢式PCR微流控方法，该方法针对目标检测物的DNA序列设计由两对引物构成的巢式引物，将待测样品DNA加入含外引物的PCR反应体系混匀后注入连续流动式巢式PCR微流控装置中，使PCR反应液沿螺旋缠绕在三个独立控温的恒温铜柱片上的毛细管完成20~35个PCR扩增循环，并由毛细管末端的荧光检测与分析系统对扩增产物进行荧光图像采集与分析。将扩增产物加入包含内引物的PCR反应体系中，如上所述完成巢式PCR第二步扩增与产物检测。通过对两轮扩增产物荧光图像强度的分析，可确定待测样品中目标检测物的存在与否及其相对量。本发明可实现对低丰度DNA样品的低成本高灵敏快速检测，检出限可达1个拷贝数/总体积，所用时间仅为35~45min。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 连续 流动 pcr 微流控 方法 | ||
【主权项】：
一种连续流动巢式PCR微流控方法，包括如下步骤：1）提取待测样本的基因组DNA；2）引物设计：针对目标检测物的特异性基因DNA序列设计由一对外引物和一对内引物构成的巢式引物；3）配制PCR反应体系：第一轮PCR反应体系含有外引物；第二轮PCR反应体系含有内引物；4）第一轮PCR反应：将待测物的DNA样品加入第一轮PCR反应体系中，得到第一轮PCR反应液，将第一轮PCR反应液注入连续流动巢式PCR微流控装置中，完成20~35个PCR热循环；5）第二轮PCR反应：取部分第一轮PCR扩增产物加入第二轮PCR反应体系中，充分混匀后，得到第二轮PCR反应液，将第二轮PCR反应液注入连续流动巢式PCR微流控装置中，完成20~35个PCR热循环。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于华南师范大学，未经华南师范大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201210066670.4/，转载请声明来源钻瓜专利网。
