[发明专利]猪瘟病毒核酸定量检测试剂盒、检测方法、引物及其探针

摘要

本发明公开了一种猪瘟病毒核酸定量检测试剂盒、检测方法、引物及其探针，属于生物技术领域。本发明试剂盒包括PCR反应液，其中包括DEPC处理水、Taq酶、M-MLV反转录酶、RNase抑制剂、dNTPMix、10×一步法RT-PCRBuffer、MgCl2溶液、猪瘟病毒正向引物：5'-AACGGYAGTGCTTTCTAYC-3'、猪瘟病毒反向引物：5'-GTGGRAAAGGCTTCTCTC-3'、猪瘟病毒LNA探针5'-accActTctGtyCtca-3'；试剂盒中还包括RNA提取液、阴性质控品、工作标准品、阳性质控品和临界阳性质控品。本发明采用实时荧光定量PCR技术定量检测猪瘟病毒核酸，具有特异、灵敏、快速、操作简便的优点。

主权项

一种猪瘟病毒核酸定量检测引物和探针，包括如下的序列组：1）包括下述正向引物，反向引物和荧光探针的一组序列：正向引物：5'‑AACGGYAGTGCTTTCTAYC‑3'，反向引物：5'‑GTGGRAAAGGCTTCTCTC‑3'，荧光探针：5'‑ accActTctGtyCtca ‑3'，其中下标为LNA修饰；2）上述1）中序列的5’ 端和/或3’ 端有延长的核苷酸片段的一组序列；3）与上述1）或2）中序列的同源性大于85%，且具有特异性的一组序列；4）与上述1）或2）或3）中序列的碱基互补的一组序列；5）上述1）、2）和3）中任何三个或多个序列形成的具有正向引物、反向引物以及与之向对应的荧光探针的序列组；其中，所述序列中Y为C或T，R为A或G。