[发明专利]一种检测K-ras基因突变的方法及试剂盒有效
| 申请号： | 201110330793.X | 申请日： | 2011-10-27 |
| 公开（公告）号： | CN102399872A | 公开（公告）日： | 2012-04-04 |
| 发明（设计）人： | 李凯;张佳;王庆琳;肖莉;王伟大;姬云 | 申请（专利权）人： | 苏州科贝生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 苏州创元专利商标事务所有限公司 32103 | 代理人： | 陶海锋 |
| 地址： | 215123 江苏省苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明属于分子生物学领域，公开了一种利用PCR扩增检测K-ras基因突变的方法及试剂盒，包括：常规PCR组件，特异性引物；所述特异性引物包括三条正向引物和一条反向引物，其中三条正向引物的序列分别具有SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3所示核苷酸序列，所述反向引物具有SEQ ID No.4所示核苷酸序列。然后利用电泳分离PCR扩增的目的产物条带的有无，来判断K-ras基因是否存在12号密码子的GGT-GAT，GGT-GTT，13号密码子GGC-GAC三个热点突变中的至少一个。采用本发明所述检测K-ras基因突变的试剂盒和检测方法检测K-ras基因突变时，快速、准确、方法简单、成本低的优点，有利用临床使用和推广。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 检测 ras 基因突变 方法 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种检测K‑ras基因突变的试剂盒，包括：常规PCR组件，其特征在于，还包括特异性引物；所述特异性引物包括三条正向引物和一条反向引物，并且每一条正向引物的三末端第二个碱基为硫化修饰碱基；其中三条正向引物的序列分别具有SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3所示核苷酸序列，所述反向引物具有SEQ ID No.4所示核苷酸序列；所述特异性引物的核苷酸序列具体如下所示：SEQ ID No.1：5’‑TTGTGGTAGTTGGAGCTGAT‑3’；SEQ ID No.2：5’‑TTGTGGTAGTTGGAGCTGTT‑3’；SEQ ID No.3：5’‑TGGTAGTTGGAGCTGGTGAC‑3’；SEQ ID No.4：5’‑TCTGTATCAAAGAATGGTCC‑3’；所述常规PCR组件包括：高保真DNA聚合酶Pfu酶，含有硫酸镁的Pfu缓冲液，dNTPs。
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