[发明专利]一种高产过氧化氢酶的重组枯草芽孢杆菌及其构建方法和应用有效
| 申请号： | 201110328753.1 | 申请日： | 2011-10-26 |
| 公开（公告）号： | CN102382790B | 公开（公告）日： | 2018-02-23 |
| 发明（设计）人： | 陈坚;郭娅琼;堵国成;周景文;康振 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/75;C12N9/08;C12R1/125 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司23211 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高产过氧化氢酶的重组枯草芽孢杆菌及其构建方法和应用，属于遗传工程技术领域。本发明首次将CAT基因在野生型宿主菌中表达。出发菌株为野生型枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis WSHDZ‑01)，由武汉中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为CCTCC NOM206062。将其CAT基因katA利用表达载体pSTOP1622在野生菌株中进行表达，大幅度提高了CAT的产量，是原始菌株的4倍。在3L搅拌式反应器中培养，CAT活性可以提高4.19倍，达到39117U/mL。本发明为CAT的过量表达提供了方法，具有广阔的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 高产 过氧化氢酶 重组 枯草 芽孢 杆菌 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种高产过氧化氢酶的重组枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述重组枯草芽孢杆菌含有克隆有过氧化氢酶基因的质粒pSTOP1622‑katA，所述过氧化氢酶基因克隆于pSTOP1622质粒木糖启动子下游，所述katA基因来源于枯草芽孢杆菌B.subtilis WSHDZ‑01；所述过氧化氢酶基因含有编码自身信号肽和启动子的序列，扩增来源于枯草芽孢杆菌B.subtilis WSHDZ‑01的katA基因的引物对为：katA primer1：5'‑GGACTAGTAAAAGCTGTTACAACAAGTT‑3'katA primer2：5'‑TCCCCCCGGGGATGAGAAGCATACGCAATG‑3'。
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